[发明专利]撒丁岛梭菌7α-羟基类固醇脱氢酶突变体K179M有效
| 申请号： | 201711123463.7 | 申请日： | 2017-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN107841489B | 公开（公告）日： | 2020-02-18 |
| 发明（设计）人： | 祝连彩;撖菁萱;姚恺怡;唐士金;王伯初;季顺林;娄德帅;谭君 | 申请（专利权）人： | 重庆大学 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12N15/53;C12P33/02 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 吕小琴 |
| 地址： | 400040 重庆市沙坪坝*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 撒丁岛梭菌 羟基 类固醇 脱氢酶 突变体 k179m | ||
1.一种提高野生型撒丁岛梭菌 7α-羟基类固醇脱氢酶的酶活及稳定性的方法，其特征在
于，将所述野生型撒丁岛梭菌 7α-羟基类固醇脱氢酶第 179 位的赖氨酸突变为甲硫氨酸；所述野生型撒丁岛梭菌 7α-羟基类固醇脱氢酶的氨基酸序列如 SEQ ID NO：1 所示。
2.根据权利要求 1 所述的方法，其特征在于，进行所述突变后得到的撒丁岛梭菌 7α-羟基类固醇脱氢酶酶突变体的酶活及稳定性相较所述野生型撒丁岛梭菌 7α-羟基类固醇脱氢酶显著提高。
3.一种撒丁岛梭菌 7α-羟基类固醇脱氢酶突变体 K179M，其特征在于，其氨基酸序列如
SEQ ID NO：2 所示。
4.编码权利要求 3 所述的撒丁岛梭菌 7α-羟基类固醇脱氢酶突变体 K179M 的基因。
5.根据权利要求 4 所述的基因，其特征在于，其核苷酸序列如 SEQ ID NO：3 所示。
6.一种表达盒，其特征在于，包含权利要求 4 所述的基因。
7.一种载体，其特征在于，包含权利要求 4 所述的基因，和/或权利要求 6 所述的表达盒。
8.一种重组细胞，其特征在于，包含权利要求 4 所述的基因，和/或权利要求 6 所述的表达盒，和/或权利要求 7 所述的载体。
9.一种催化剂，其特征在于，其有效成分包含权利要求3所述的撒丁岛梭菌 7α-羟基类固醇脱氢酶突变体 K179M。
10.根据权利要求 9 所述的催化剂，其特征在于，还包括与权利要求 3 所述的撒丁岛梭菌 7α-羟基类固醇脱氢酶突变体 K179M 同时使用时能够提高酶催化效率或增加酶稳定性的其它试剂。
11.一种实现化学物质的羰基不对称还原的方法，其特征在于，使用权利要求3所述的撒丁岛梭菌 7α-羟基类固醇脱氢酶突变体 K179M，和/或权利要求 9 或 10 所述的催化剂与反应底物在 20-50°C、pH 6.0-11.0 条件下进行催化反应。
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