[发明专利]一种沉默表达WSB2蛋白的慢病毒的构建方法及其应用在审
| 申请号： | 201711126521.1 | 申请日： | 2017-11-15 |
| 公开（公告）号： | CN109777787A | 公开（公告）日： | 2019-05-21 |
| 发明（设计）人： | 宋鑫;张一;李真;孟旭东 | 申请（专利权）人： | 信雅生物科技（苏州）有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N5/10;C12N15/867;C12N15/113;A61K31/713;A61P35/00 |
| 代理公司： | 上海宣宜专利代理事务所(普通合伙) 31288 | 代理人： | 刘君 |
| 地址： | 215123 江苏省苏州市苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 慢病毒 蛋白 构建 人黑色素瘤细胞 沉默表达 低表达 基因沉默效果 增殖 应用 | ||
1.一种构建在人黑色素瘤细胞中沉默表达WSB2蛋白的慢病毒的方法，其特征在于：合成RNAi的DNA模板序列
WSB2-RNAi-1：
正义链：CTTCGAAGTTTCCTAACAA
反义链：GAAGCTTGCCCGGATTGTT
WSB2-RNAi-2：
正义链：CGGCTTCTTACGATACCAA
反义链：GCCGAAGAATGCTATGGTT
WSB2-RNAi-3：
正义链：AGACACTATTACTGGCTTT
反义链：TCTGTGATAATGACCGAAA
2.用权利要求1的方法构建的沉默表达WSB2基因的慢病毒，包括LV-shWSB2-1、LV-shWSB2-2、LV-shWSB2-3。
3.用权利要求1的方法构建的WSB2低表达黑色素瘤细胞。
4.如权利要求2所述的慢病毒在制备治疗黑色素瘤药物方面的应用，其特征在于，能够在体外抑制黑色素瘤A375细胞的增殖。
5.如权利要求2所述的慢病毒在制备治疗黑色素瘤药物方面的应用，其特征在于，能够抑制裸鼠体内黑色素瘤细胞的增殖。
6.如权利要求2所述的慢病毒在制备治疗黑色素瘤药物方面的应用，其特征在于：能够抑制黑色素瘤A375细胞的转移。
7.如权利要求2所述的慢病毒在制备治疗黑色素瘤药物方面的应用，其特征在于：能够阻碍黑色素瘤A375细胞由G1期进入S期。
8.如权利要求2所述的慢病毒在制备治疗黑色素瘤药物方面的应用，其特征在于：能够使p53、周期蛋白等增殖相关蛋白水平改变。
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