[发明专利]一种D-二聚体检测试剂盒及其使用方法

说明书

本发明属于体外诊断试剂盒领域，具体涉及一种D‑二聚体检测试剂盒及其使用方法，所述D‑二聚体检测试剂盒包括：校准品、试剂R1、酶结合物工作液R2、磁珠结合物工作液M、清洗液及化学发光底物，所述试剂R1含有咪唑成分，其可以快速消除全血中的血细胞，有效避免血细胞吞进磁珠的可能。本发明的试剂盒可直接使用手指末梢全血或抗凝静脉全血作为待检样品，无需预先对全血样本进行预处理，就可直接进行检测，大大提高了检测速度，简化了操作步骤，扩大了试剂盒的适用范围，便于大范围推广应用。

技术领域

本发明属于体外诊断试剂盒领域，具体涉及一种D-二聚体检测试剂盒及其使用方法。

背景技术

纤维蛋白溶解系统是人体最重要的抗凝系统，它对保持血管壁的正常通透性及维持血液的流动状态和组织修复起着重要作用，该系统由4种主要部分组成：纤溶酶原、纤溶酶原激活剂、纤溶酶和纤溶酶抑制物。当纤维蛋白凝结块形成时，在纤溶酶原激活剂的存在下，纤溶酶原激活转化为纤溶酶，纤维蛋白溶解过程开始，纤溶酶降解纤维蛋白凝结块形成各种可溶片段，形成纤维蛋白降解产物(FDP)。其中，D-二聚体是降解产物中最小的片段，是交联纤维蛋白的特异性降解产物，分子量约62ku，在体内半衰期约3h，主要经肾脏排泄与网状内皮系统破坏。

在正常生理状态下，人体正常D-二聚体含量小于200ug/L，但一旦机体血管内有活化的血栓形成及纤维溶解活动，凝血与纤溶的动态平衡遭到破坏，凝血倾向增强，从而纤维蛋白降解产物增加，导致D-二聚体含量增加。因此，D-二聚体的生成和增高反映了凝血和纤溶系统的激活，故临床上其可作为血液高凝状态和继发性纤溶亢进的特异性指标，D-二聚体含量的变化可以用来检测具有凝血和纤溶过程的一类疾病，如深静脉血栓(DVT)、肺栓塞(PE)、弥散性血管内凝血(DIC)、重症肝炎等疾病的检测。因此，血液中D-二聚体的检测对多种疾病的诊断及治疗具有非常重要的临床意义。

目前临床常用的D-二聚体检测方法主要有：乳胶凝集法、酶联免疫吸附法、胶体金免疫渗滤法和免疫比浊法，这些检测方法都是基于抗原抗体特异性结合的原理而设计。如中国专利文献CN104360072B公开了一种粒子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用的D-二聚体乳胶增强免疫比浊检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2两种组分，所述试剂R2中的稳定剂采用粒子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用，该试剂盒采用胶乳增强免疫比浊法，可在400～800nm的波长下进行检测。然而，上述文献公开的技术中采用的样本为血浆或血清，需要静脉取血且采血量大，样本使用前还需离心，无法直接采用手指微量全血作为检测样本，检测速度慢，因此不能很好的满足医院急诊和门诊快速诊断的需求；另外，该试剂盒的检测范围为0.01～27.3ng/mL，检测范围窄，不利于临床大范围的推广应用。

发明内容

因此，本发明要解决的技术问题是现有的D-二聚体检测试剂盒采用血浆或血清为样本，操作繁琐且检测范围窄的缺陷，从而提供一种可以直接使用全血作为样本且检测范围宽的D-二聚体检测试剂盒；进一步地，本发明还提供了所述检测试剂盒的使用方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种D-二聚体检测试剂盒，包括：

(1)校准品；

(2)试剂R1；

(3)酶结合物工作液R2；

(4)磁珠结合物工作液M；

(5)清洗液；

(6)化学发光底物；

所述试剂R1含有咪唑成分。

优选地，所述试剂R1包括：25～100mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、150mmol/L NaCl、1～5％蔗糖、1～5％甘油、0.1％牛血清白蛋白、0.4～2mmol/L咪唑、0.05～0.2％吐温20和0.05～0.2％Proclin300，pH为7.0～7.5。