[发明专利]一种基于PCR和磁珠抗体富集技术的快速检测靶标物的方法在审
| 申请号： | 201711130951.0 | 申请日： | 2017-11-15 |
| 公开（公告）号： | CN109283329A | 公开（公告）日： | 2019-01-29 |
| 发明（设计）人： | 孔惠 | 申请（专利权）人： | 广州弗赛生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/543 | 分类号： | G01N33/543;G01N33/574;G01N33/532 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 510000 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 靶标物 磁性微球表面 核酸适配体 抗体 抗体富集 快速检测 磁珠 扩增 检测 生物技术领域 等温扩增法 三明治结构 特异性识别 磁性微球 浓度结果 富集 | ||
1.一种基于PCR和磁珠抗体富集技术的快速检测靶标物的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：在磁性微球表面标记能够识别靶标物的抗体或核酸适配体；
步骤2：在步骤1得到的磁性微球表面通过抗体或核酸适配体富集靶标物；
步骤3：将能够特异性识别靶标物的DNA标记物与步骤2得到的磁性微球的靶标物结合；
步骤4：将磁性微球表面的带有抗体或核酸适配体-靶标物-DNA标记物的三明治结构分离，并通过PCR或等温扩增法扩增DNA标记物；
步骤5：检测扩增后的DNA标记物，得到靶标物的浓度结果。
2.根据权利要求1所述的基于PCR和磁珠抗体富集技术的快速检测靶标物的方法，其特征在于，靶标物为细菌、病毒、病原体、细胞或蛋白质。
3.根据权利要求1所述的基于PCR和磁珠抗体富集技术的快速检测靶标物的方法，其特征在于，步骤1的磁性微球为经过羧基化的磁性微球。
4.根据权利要求3所述的基于PCR和磁珠抗体富集技术的快速检测靶标物的方法，其特征在于，所述的DNA标记物为末端带有氨基或羧基的单链核酸。
5.根据权利要求4所述的基于PCR和磁珠抗体富集技术的快速检测靶标物的方法，其特征在于，所述的步骤2中抗体或核酸适配体与靶标物的偶联、步骤3中靶标物和DNA标记物的偶联均通过碳化二亚胺进行偶联。
6.根据权利要求1所述的基于PCR和磁珠抗体富集技术的快速检测靶标物的方法，其特征在于，所述的步骤5中扩增后的DNA标记物通过荧光定量方法或核酸胶体金检测卡进行检测。
7.根据权利要求1所述的基于PCR和磁珠抗体富集技术的快速检测靶标物的方法，其特征在于，所述的磁性微球的粒径为25nm。
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