[发明专利]β2-微球蛋白测定试剂盒

权利要求书

1.一种β₂-微球蛋白检测试剂盒，其特征在于：由彼此独立的试剂R1和试剂R2组成；所述试剂R1的组分包括：缓冲剂、防腐剂和水；所述试剂R2的组分包括：包被β₂-微球蛋白抗体的乳胶颗粒、防腐剂和水；其特征在于：所述的乳胶颗粒为粒径1.5-2.0μm的聚苯乙烯乳胶颗粒，每1升试剂R2中各组分的用量为：β₂-微球蛋白抗体的乳胶颗粒0.05-0.5mg，防腐剂0.2-10g；

所述试剂R2中还有聚六亚甲基胍和苯甲醇。

2.按照权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述的缓冲液选自磷酸缓冲液、甘氨酸缓冲液、HEPES缓冲液、硼酸缓冲液或氯化铵缓冲液中的一种或几种；防腐剂选自叠氮钠、ProClin防腐剂中的一种或几种。

3.按照权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于：每1升试剂R1中各组分的用量为：缓冲剂5-100mmol，防腐剂0.2-10g。

4.按照权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于：每1升试剂R1中各组分的用量为：氯化铵20mmol，叠氮钠0.95g；每1升试剂R2中各组分的用量为：β₂-微球蛋白抗体的乳胶颗粒0.18mg，叠氮钠0.95g。

5.按照权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述试剂R2中聚六亚甲基胍的用量为0.5g/l，苯甲醇的用量为0.2g/l。

6.按照权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述包被β₂-微球蛋白抗体的乳胶颗粒的制备方法为：

（1）用MES缓冲液将表面带有羧基功能基团、直径1.5-2.0μm的聚苯乙烯微粒稀释至终浓度为0.5-3%（wt），加入50-90mM EDAC，混合均匀，室温震荡反应30-80分钟；

（2）将步骤（1）所得混合液离心，弃上清液，用MES缓冲液清洗两次，最终胶乳微粒重悬于MES缓冲液，超声进行分散，得微粒分散液；

（3）用MES缓冲液稀释β₂-微球蛋白抗体，与步骤（2）中微粒分散液混合，于室温反应2-4小时；

（4）将步骤（3）所得反应液18000rpm离心30min后，用Tris缓冲液重悬微粒，室温封闭反应1-3小时；

（5）将步骤（4）所得反应液离心，弃上清液，用Tris缓冲液清洗胶乳3次，最后用R2试剂保存液重悬胶乳沉淀并稀释至1%，超声充分分散后即获得包被β₂-微球蛋白抗体的乳胶颗粒。

7.按照权利要求1-5任何一项的检测试剂盒，其特征在于：试剂R1的pH值范围为6.5-8.5。

8. 按照权利要求1-5任何一项的检测试剂盒，其特征在于：其在使用时，检测主波长为540nm，副波长为700nm，测定方法采用终点法：270μl试剂R1加入3μl样本，于37℃温育5min后加入30μl试剂R2 10s后即开始读数，3min后再次读数，然后计算吸光度算差值。