[发明专利]β2-微球蛋白测定试剂盒

说明书

本发明属于医学及生物化学技术领域，具体是一种β₂‑微球蛋白检测试剂盒。该试剂盒由试剂R1、试剂R2和校准品组成，试剂R1包括：缓冲剂、防腐剂和水；试剂R2包括：包被β₂‑微球蛋白抗体的乳胶颗粒、防腐剂和水；校准品包括：β₂‑MG、氯化钠、牛血清白蛋白、蔗糖、Proclin300。该β₂‑微球蛋白检测试剂盒采用乳胶增强免疫比浊法来进行测定，相对于传统的β₂‑微球蛋白检测试剂盒，具有快速灵敏、准确性好、特异性高、稳定性好等优点。

技术领域

本发明涉及医学及生物化学技术领域，具体是一种测定β₂-微球蛋白的试剂盒。

背景技术

β₂-微球蛋白在1968年首次被分离发现，是分子量为11815Da的血清蛋白质，其分子内含有一对二硫键，血清蛋白电泳位于β₂区域。淋巴细胞、血小板、多核白细胞等 均能合成β₂-微球蛋白，且人体内几乎所有有核细胞均能合成β₂-微球蛋白，但其主要 是由淋巴细胞合成。β₂-微球蛋白广泛存在于人的血清、脑脊液、尿液、初乳、唾液等 体液中，且含量微小。

β₂-微球蛋白的合成稳定，正常情况下其平均生成速率约为2.4mg/kg/day，β₂-微球蛋白的代谢仅依赖于肾脏，由细胞表面脱落或释放进入血液的微球蛋白，从肾小球自 由滤过，99.9％在近端肾小管重吸收并分解代谢，不再流入血液循环，因而在正常情况 下血清β₂-微球蛋白含量稳定，正常人群血清β₂-微球蛋白参考值范围为0-3mg/ml。

β₂-微球蛋白分子量小，极少有肾外的分解代谢，其在体内的产生速率很定，年龄、性别、肌体肌肉组织不会影响其血清水平含量。在体内β₂-微球蛋白生成不增加的情况 下，血清β₂-微球蛋白水平升高是反映肾小球过滤功能损伤的极灵敏指标，而且比血清 尿素氮、肌酐对肾小球滤过的评价更敏感。因此，β₂-微球蛋白是诊断早期肾功能损伤 的敏感指标，尤其对于糖尿病肾病、高血压肾病、红斑狼疮肾炎的早期诊断具有重要的 临床应用价值。

此外，由于所有有核细胞均可产生β₂-微球蛋白，这也包括了肿瘤细胞，因此当机体发生肿瘤时，由于肿瘤合成β₂-微球蛋白增加或其表面β₂-微球蛋白释放增加或肿瘤 致肾功能减退，均可引起β₂-微球蛋白水平的升高。因此在肾功能没有损害的情况下， β₂-微球蛋白可以作为肿瘤的血清标志物，被临床用于多种恶性肿瘤的诊断、预后评价 和复发检测，如恶性血液病、口腔肿瘤等。

由于β₂-微球蛋白含量微小，因此要求其测定方法具备较高的分析灵敏度，最初Berggard等使用单向免疫扩散实验来进行体液中β₂-微球蛋白的测定，随后使用放射免 疫分析法对β₂-微球蛋白的含量进行测定。此方法的灵敏度、特异性均良好，而且与单 项免疫扩散试验具有良好的相关性，但是不足之处在于其存在放射性污染。此后，随着 对β₂-微球蛋白研究的深入和技术的进步，出现了酶免疫抑制法和ELISA法，这两种方 法的敏感度、特异性以及精密度均高，不需要复杂的设备，也容易实现自动化，最重要 的是解决了实验人员接触放射性污染存在人身安全的问题。但是酶免疫抑制法和ELISA 法的酶促反应易受外界因素的干扰，存在操作繁琐、重复性差、准备工作多、受人为因 素影响较大的缺点。