[发明专利]一种NGAL胶乳免疫比浊法检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白胶乳免疫比浊法检测试剂盒，包括试剂R1、试剂R2和校准品，其中，所述试剂R2包括抗体、胶乳颗粒和R2缓冲液，其特征在于：所述试剂R2所用封闭剂为聚乙二醇六氨，聚乙二醇六氨的化学结构式为H-(O-CH₂-CH₂)n-(NH)₅-NH₂。

2.根据权利要求1所述的一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白胶乳免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于：所述抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。

3.根据权利要求1所述的一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白胶乳免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于：所述胶乳颗粒粒径为100-400nm，表面电荷为0.05-0.2mmol/g。

4.根据权利要求1所述的一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白胶乳免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于：所述R2缓冲液包括缓冲液，所述缓冲液包括磷酸盐缓冲液、HEPES缓冲液、MES缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼酸缓冲液、醋酸缓冲液或柠檬酸缓冲液中的任意一种或几种；所述缓冲液pH为5.0-10.0。

5.根据权利要求1所述的一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白胶乳免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于：所述R2缓冲液还包括电解质、表面活性剂、防腐剂、生物稳定剂中的任意一种或几种，所述电解质、表面活性剂、防腐剂、生物稳定剂中的任意一种或几种使用时混合于所述缓冲液中。

6.一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白胶乳免疫比浊法检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述试剂R2的制备包括如下步骤：

(1)使用包被缓冲液分别对胶乳颗粒与抗体进行稀释，将稀释后的胶乳颗粒与抗体混合均匀，形成胶乳颗粒与抗体的混合液；

(2)向胶乳颗粒与抗体的混合液中加入EDC进行活化，搅拌后离心去上清；

(3)向步骤(2)离心后的沉淀中加入聚乙二醇六氨，搅拌过夜后离心去上清；

(4)向步骤(3)离心后的沉淀中加入R2缓冲液进行重悬，超声分散均匀，并于25-60℃熟化16-72小时，得到稳定的抗体包被的胶乳颗粒；

(5)使用R2缓冲液将步骤(4)得到的抗体包被的胶乳颗粒稀释到0.05-0.2％wt，4-10℃保存。

7.根据权利要求6所述的一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白胶乳免疫比浊法检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述包被缓冲液包括磷酸盐缓冲液、HEPES缓冲液、MES缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼酸缓冲液、醋酸缓冲液或柠檬酸缓冲液中的任意一种或几种；所述包被缓冲液pH为5.0-10.0。

8.根据权利要求6所述的一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白胶乳免疫比浊法检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述聚乙二醇六氨的使用浓度为0.1-0.5％wt，所述聚乙二醇六氨的使用体积与步骤(2)中胶乳颗粒与抗体的混合液体积相同。

9.根据权利要求6所述的一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白胶乳免疫比浊法检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)、(2)、(3)中搅拌过程的温度为25-55℃。