[发明专利]甘蓝型油菜雌雄不育系Bnmfs利用分子标记筛选的引物及方法

权利要求书

1.一种甘蓝型油菜雌雄不育系Bnmfs分子标记筛选的方法，其特征在于，甘蓝型油菜雌雄不育系Bnmfs分子标记筛选的方法使用的甘蓝型油菜雌雄不育系Bnmfs分子标记筛选的引物的序列为：SEQ ID NO：1-SEQ ID NO：22；

所述甘蓝型油菜雌雄不育系Bnmfs分子标记筛选的方法包括以下步骤：

步骤一，不育系Bnmfs的不育基因定位群体构建：由于雌雄不育材料，利用杂合可育单株连续套袋自交获得F7-F9群体进行定位；

步骤二，已公布的标记对不育系Bnmfs的不育基因进行初步定位：筛选与不育系Bnmfs的不育基因连锁的分子标记，进行初步定位，定位在染色体上；已公布的标记是指AFLP标记和已知引物序列的SSR标记；

步骤三，开发新的分子标记：根据不育系Bnmfs的不育基因所在染色体的区间序列用SSRHunter1.3软件检测SSR位点，并使用Primer5软件设计SSR引物；InDel标记是根据重测序在该区间的SNP设计；

步骤四，缩小不育系Bnmfs的不育基因在染色体的区间：用新的SSR标记和InDel标记对不育系Bnmfs的不育基因进行定位，缩小不育基因在染色体上的区间；

步骤五，共显性标记筛选：对新的分子标记在F8-F9群体中进行共显性标记筛选。

2.如权利要求1所述的甘蓝型油菜雌雄不育系Bnmfs分子标记筛选的方法，其特征在于，所述甘蓝型油菜雌雄不育系Bnmfs分子标记筛选的方法包括以下步骤：利用重测序技术对雌雄不育植株和纯合可育植株进行BSA测序，各取20个单株，得到三个差异区间，都在甘蓝型油菜C3染色体上；根据重测序结果获得的三个差异区间的SNP设计InDel标记以及1对SSR引物2Mb范围内设计SSR引物共220对，获得11对多态性标记，InDel标记6对，SSR标记5对，重测序的两个区间没有多态性标记，排除该两区间，限定在1.11Mb的区间内。

3.一种使用权利要求1所述甘蓝型油菜雌雄不育系Bnmfs分子标记筛选的方法鉴定甘蓝型油菜可育株的纯合和杂合的方法。