[发明专利]简并引物及利用该引物克隆植物中抗病虫害蛋白基因的方法在审
| 申请号： | 201711148288.7 | 申请日： | 2017-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN107937393A | 公开（公告）日： | 2018-04-20 |
| 发明（设计）人： | 鲍锦库;吴传芳;梁丹凤;龙鑫;袁媛 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/29;C12N15/10 |
| 代理公司： | 成都中亚专利代理有限公司51126 | 代理人： | 李文荣 |
| 地址： | 610041 四川省成*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 引物 利用 克隆 植物 抗病 虫害 蛋白 基因 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种简并引物，其特征在于：
上游引物：5’- AYGGNCCNTAYACNTTYATHATGC-3’；
下游引物： 5’- RTNAGTNCCNGTNGCCCAYT-3’；
所述简并引物中：R=A/G，Y=C/T，M=A/C，K=G/T，S=G/C，W=A/T，H=A/T/C，B=G/T/C，V=G/A/C，N=A/T/G/C。
2.一种大规模克隆植物中抗农业病虫害蛋白基因的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：利用权利要求1所述的一对简并引物对单子叶植物甘露糖结合蛋白基因的保守序列进行PCR反应，然后以此PCR产物为反应模板，利用3’，5’RACE的方法，对该单子叶植物甘露糖结合蛋白基因序列进行PCR反应，最终克隆到目的基因。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，单子叶植物包括但不局限于兰科（Orchidaceae）、百合科（Liliaceae）、天南星科（Araceae）、石蒜科（Amaryllidaceae）植物。
4.根据权利要求2或3所述方法得到的具有抗农业病虫害生物活性的蛋白。
5.根据权利要求4所的蛋白，其特征在于，所述农业病虫害包括：刺吸式口器害虫中的棉蚜、麦蚜、桃蚜蚜虫、褐飞虱、叶蝉及鳞翅目害虫；以及水稻稻瘟病、纹枯病、小麦赤霉病。
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