[发明专利]一种小鼠骨髓造血干/祖细胞体外衰老细胞模型的建立方法有效
| 申请号： | 201711157564.6 | 申请日： | 2017-11-20 |
| 公开（公告）号： | CN107858330B | 公开（公告）日： | 2021-08-27 |
| 发明（设计）人： | 张丽娜;金国琴;顾伟梁;张学礼;胡海燕;许言午 | 申请（专利权）人： | 上海中医药大学 |
| 主分类号： | C12N5/0789 | 分类号： | C12N5/0789;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 上海唯智赢专利代理事务所(普通合伙) 31293 | 代理人： | 吴瑾瑜 |
| 地址： | 201203 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 小鼠 骨髓 造血 细胞 体外 衰老 模型 建立 方法 | ||
1.一种小鼠骨髓造血干/祖细胞体外衰老细胞模型的建立方法，其特征在于，步骤包括:
小鼠骨髓细胞经过lineage阴性富集和CD117阳性筛选；lineage阴性富集为CD5、CD45R、CD11b、Ly-6G/C、7-4和Ter-119阴性富集，再经过CD117阳性筛选，分离获取得到小鼠骨髓造血干/祖细胞；
用加入IL3、IL6和 SCF的干细胞培养基培养5～10天；
所述的干细胞培养基中，IL3的含量为8～20ng/mL，IL6的含量为8～20ng/mL， SCF的含量为25～60ng/mL。
2.权利要求1所述小鼠骨髓造血干/祖细胞体外衰老细胞模型的建立方法，其特征在于，所述的干细胞培养基中，IL3的含量为9～12ng/mL，IL6的含量为9～12ng/mL，SCF的含量为27～35ng/mL。
3.权利要求1所述小鼠骨髓造血干/祖细胞体外衰老细胞模型的建立方法，其特征在于，培养过程中，每2～3天更换干细胞培养基。
4.权利要求1所述小鼠骨髓造血干/祖细胞体外衰老细胞模型的建立方法，其特征在于，所述的干细胞培养基为无血清培养基。
5.权利要求1或4所述小鼠骨髓造血干/祖细胞体外衰老细胞模型的建立方法，其特征在于，所述的干细胞培养基中还含有链霉素和青霉素。
6.权利要求1～5任一项所述的建立方法所获得的小鼠骨髓造血干/祖细胞体外衰老细胞模型。
7.权利要求6所述的小鼠骨髓造血干/祖细胞体外衰老细胞模型用于筛选抗衰老药物。
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