[发明专利]一种昆虫细胞的光控表达载体及应用有效
| 申请号： | 201711177112.4 | 申请日： | 2017-11-22 |
| 公开（公告）号： | CN107937437B | 公开（公告）日： | 2020-10-27 |
| 发明（设计）人： | 吴阳;徐富强;何晓斌;蔡泽蕲;蒋良玉;梅婷;尚敏 | 申请（专利权）人： | 中国科学院武汉物理与数学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/65 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 龚莹莹 |
| 地址： | 430071 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 昆虫 细胞 光控 表达 载体 应用 | ||
1.一种应用于昆虫细胞的光控表达载体，所述载体的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示。
2.一种带有外源基因的昆虫细胞的光控表达载体的制备方法，包括：
1)外源基因通过EcoR1和Xba1酶切位点置换pC120-Luc质粒中的Luc基因，得到pC120-外源基因质粒；
2)以pC120-外源基因质粒为模板，扩增C120-外源基因片段，插入pMIB/V5-his载体的Bsp H1和Age1酶切位点中，得到pMIB-C120-外源基因质粒；
3)人工合成SEQ ID NO.2所示核苷酸片段，克隆置于psimple-T载体中，得到psimple-T/PF T2AN载体，通过psimple-T/PFT2AN中的NheⅠ 酶切位点引入荧光蛋白报告基因，再通过psi mple-T/PFT2AN中的BsiwI酶切位点引入EL222基因，得到psimple-T/荧光蛋白-EL222质粒；
4)将psimple-T/荧光蛋白-EL222质粒中的荧光蛋白-EL222片段，通过PvuII和BglII酶切位点插入到pMIB-C120-外源基因质粒中，即得。
3.权利要求1所述的载体或权利要求2所述方法制备的载体在构建昆虫细胞的光控表达平台中的应用。
4.权利要求1所述的载体或权利要求2所述方法制备的载体在控制蛋白的表达中的应用。
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