[发明专利]一种脑血疏制剂指纹图谱的测定方法

说明书

本发明涉及一种药用制剂的检测方法，具体涉及一种中药制剂脑血疏口服液指纹图谱的构建方法。本发明主要采用高效液相色谱法检测，流动相：乙腈‑0.1％磷酸水，流动相A为0.1％磷酸水，流动相B为乙腈，检测波长223nm，柱温30℃，进样量10μl，所有组分均在90min内被检测完。

技术领域

本发明涉及一种药用制剂的检测方法，具体涉及一种中药制剂脑血疏指纹图谱的测定方法。

背景技术

脑血管病是当今世界危害人类健康的三大疾病之一，是中老年人的多发病，死亡率很高，在我国脑血管病占死因的第二位。国内报道脑出血死亡率为38-43%，幸存者约有50%-70%患者留有严重的后遗症，生活不能自理，不仅病人遭受极大痛苦，也给家庭和社会造成负担。

中药治疗脑血管病有其优势，如已经上市的中药脑血疏口服液，其配方和工艺描述在中国专利200810100200.9，“一种中药脑血疏制剂”中，该专利描述了一种由中药黄芪、水蛭、石菖蒲、牛膝、牡丹皮、大黄、川芎等制成中药制剂，经过实验发现，该制剂具有益气、活血、化瘀作用，主治中风急性期及恢复早期，属气虚血瘀证。自脑血疏制剂上市以来，因其治疗效果好，见效快，价格便宜，受到了广大患者的好评。

脑血疏口服液作为一种中药复方制剂，处方药材较多(由7味药材组成)，成分非常复杂多样。在“脑血疏口服液标准”(国家食品药品监督管理局新药转正标准)中采用薄层色谱法仅建立了黄芪甲苷单个成分的含量测定方法。但脑血疏口服液为复方制剂，单纯通过检测一种指标成分定量来控制其药品质量显然是不全面的，也不能体现中药复方制剂的整体性特征。因此，开发建立一种简便易行，准确性高，重复性良好且能尽可能多地反映复方制剂所含多成分的指纹图谱检测方法对于脑血疏口服液的质量控制和评价非常必要。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明的目的是提供一种脑血疏口服液指纹图谱构建方法及其指纹图谱。本发明通过对脑血疏口服液指纹图谱的研究，提供了一种操作简便、稳定、精密度高和重现性好，可用于脑血疏口服液的质量检测和评价的方法，弥补了现有质量控制方法的不足，使脑血疏口服液的质量控制技术更为完善、科学。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

(1)供试品溶液的制备：取脑血疏口服液，加入甲醇，超声提取，过滤，取续滤液，即得供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：取减压干燥至恒重的黄芪甲苷、水蛭素、β-细辛醚、牛膝总皂苷、丹皮酚、大黄酸、川芎嗪对照品，分别加入甲醇制成对照品溶液；

(3)测定：分别精密量取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪测定，记录色谱图；

(4)用指纹图谱软件对所得图谱进行处理，即得脑血疏口服液指纹图谱；

步骤(3)中，测定的液相色谱条件为：色谱柱为PHENOMENEX LUNA C-18色谱柱；流动相A为0.1％磷酸水溶液(体积分数)，流动相B为乙腈；梯度洗脱；流动相流速为0.9ml/min；柱温为30℃；检测波长为223nm。

步骤(3)中，梯度洗脱过程中，流动相A和流动相B的变化为：

0-10min，流动相A95％-90％，流动相B 5％-10％；

10-20min，流动相A90％-80％,流动相B 10％-20％；

20-50min，流动相A80％-65％,流动相B 20％-35％；

50-60min，流动相A65％-45％,流动相B 35％-55％；

60-80min，流动相A45％-20％,流动相B 55％-80％；

80-100min，流动相A20％-5％,流动相B 80％-95％。