[发明专利]一种3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯磺酰胺的检测方法

说明书

本发明公开了3‑硝基‑4‑[[(四氢‑2H‑吡喃‑4‑基)甲基]氨基]苯磺酰胺的检测方法，采用高效液相色谱仪进行检测，采用面积归一化法进行定量分析，其色谱条件如下：色谱柱：Thermo Hypersil GOLD；进样量：15‑25μl；流速：0.8‑1.2ml/min；柱温：20‑30℃；检测波长：228‑232nm；流动相：流动相A 0.01mol/L的KH2PO4：流动相B乙腈，其体积比为(30‑90)：(10‑70)；稀释液：乙腈；检测器：DAD检测器；本发明的检测方法能够简便、准确、快速、高效、可靠的检测3‑硝基‑4‑[[(四氢‑2H‑吡喃‑4‑基)甲基]氨基]苯磺酰胺的纯度和杂质，具有很高的灵敏度，且操作简便，可以实现完全分离，进而为研究此类化合物提供了研究开发和质量检测的基础。

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，具体涉及一种3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯磺酰胺的检测方法。

背景技术

Venetoclax，ABT-199，CAS：1257044-40-8；是国际癌症研究小组开发的一种新型抗癌药物，其有希望用于对抗癌症，比现有的可用于癌症治疗的药物副作用更小，疗效更快。3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯磺酰胺，CAS号为1228779-96-1，结构式如下所示，其是生产ABT-199的重要中间体，该产品纯度、杂质大小直接影响ABT199的纯度和杂质大含量，其纯度直接影响ABT199的疗效。

目前，尚未有3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯磺酰胺的纯度检测方法的相关文献及报道，为了加强3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯磺酰胺质量控制，需要研发出其的检测方法。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的是提供一种3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯磺酰胺的检测方法。

3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯磺酰胺的结构式如下所示：

3-硝基-4-氯苯磺酰胺是3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯磺酰胺的中间体，其结构式如下：

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯磺酰胺的检测方法,包括以下步骤：

(1)分别称取3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯磺酰胺和3-硝基-4-氯苯磺酰胺置于同一容量瓶中，用稀释液溶解并定容，配制成系统适应性溶液；具体地，精密称取20-30mg的3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯磺酰胺和20-30mg的3-硝基-4-氯苯磺酰胺置于同一个50ml的容量瓶中，用稀释液溶解并定容，配制成系统适应性试验溶液；其中，3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯磺酰胺的浓度为0.4-0.6mg/ml，3-硝基-4-氯苯磺酰胺的浓度为0.4-0.6mg/ml；

(2)精密称定供试品，用稀释液进行溶解并定容，配制成供试品溶液；具体地，精密称取20-30mg的供试品，置于50ml的容量瓶中，用稀释液进行溶解并定容，配制得到浓度为0.4-0.6mg/ml的供试品溶液；

(3)精密量取稀释液，注入液相色谱仪，采用流动相进行梯度洗脱，并记录色谱图，空白不得有干扰；

(4)精密量取系统适应性试验溶液，注入液相色谱仪，采用流动相进行梯度洗脱，并记录色谱图，理论板按3-硝基-4-[[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯磺酰胺计算应不低于3000，主峰与已知杂质峰之间的分离度应不小于1.5；