[发明专利]胶原纤维马松三色染色试剂盒及其制备方法和染色方法

权利要求书

1.一种胶原纤维马松三色染色试剂盒，其特征在于，包括盒体，所述盒体内包括6个滴瓶，所述6个滴瓶内分别装有不同试剂，所述滴瓶的容量为5ml或10ml。

2.根据权利要求1所述的胶原纤维马松三色染色试剂盒，其特征在于，所述6个滴瓶中的试剂分别为苏木素染色液，盐酸分化液，返蓝液，丽春红酸性品红液，磷钼酸液和苯胺蓝液。

3.一种权利要求1或2所述胶原纤维马松三色染色试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)试剂配制

a、苏木素染色液：称取定量的苏木精溶解于无水乙醇中，得溶液A，称取定量的硫酸铝溶于蒸馏水中，得溶液B，将溶液A和溶液B混合后加入碘酸钠和冰醋酸溶解，最后经滤膜过滤；

b、盐酸分化液：量取定量的盐酸加入乙醇中混匀；

c、返蓝液：称取定量的碳酸锂溶解于蒸馏水，混匀后经滤膜过滤；

d、丽春红酸性品红液：称取定量的丽春红和酸性品红，加入蒸馏水中，混匀后加入乙酸，最后经滤膜过滤；

e、磷钼酸液：称取定量的磷钼酸溶解于蒸馏水，混匀后经滤膜过滤；

f、苯胺蓝液：称取定量的苯胺蓝溶解于蒸馏水，加入乙酸，混匀后经滤膜过滤；

2)试剂分装

分别将所述步骤1)所得苏木素染色液、盐酸分化液、返蓝液、丽春红酸性品红液、磷钼酸液和苯胺蓝液按试剂盒规格分装在滴瓶中，最后将装有6种试剂的滴瓶放置于试剂盒的盒体中。

4.根据权利要求3所述的胶原纤维马松三色染色试剂盒的制备方法，其特征在于，所述滤膜的孔径为0.45μm。

5.一种基于权利要求1或2所述胶原纤维马松三色染色试剂盒的染色方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)在组织切片上滴加1-2滴苏木素染色液，染色5-10min，水洗2-3min；

2)在步骤1)所得产物上滴加1-2滴盐酸分化液，分化2-3秒，水洗2-3min；

3)在步骤2)所得产物上滴加1-2返蓝液，返蓝6-10秒，水洗2-3min；

4)在步骤3)所得产物上滴加1-2滴丽春红酸性品红液，染色5-8min，水洗1-2min；

5)在步骤4)所得产物上滴加1-2滴磷钼酸液，染色1-3min，水洗2-3min；

6)在步骤5)所得产物上滴加1-2滴苯胺蓝液，孵育5min，水洗2-3min；

7)将步骤6)所得产物置于60℃温箱中烘干，透明、封片。