[发明专利]一种鉴别梅芳蛇鲻和花斑蛇鲻的分子标记引物及方法在审
| 申请号： | 201711186806.4 | 申请日： | 2017-11-24 |
| 公开（公告）号： | CN107699628A | 公开（公告）日： | 2018-02-16 |
| 发明（设计）人： | 张丽艳;李渊;林龙山;张然 | 申请（专利权）人： | 福建海洋研究所;国家海洋局第三海洋研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙)11427 | 代理人： | 陈娟 |
| 地址： | 361013 福建*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴别 梅芳蛇鲻 花斑 分子 标记 引物 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种鉴别梅芳蛇鲻和花斑蛇鲻的分子标记引物，该标记引物序列为：
MiFish-U-F：5’-GTCGGTAAAACTCGTGCCAGC-3′；
MiFish-U-R：5’-CATAGTGGGGTATCTAATCCCAGTTTG-3′。
2.一种鉴别梅芳蛇鲻和花斑蛇鲻的分子标记方法，其包括以下步骤：
(1)选用南海游泳动物调查采集的梅芳蛇鲻和花斑蛇鲻，组成梅芳蛇鲻样本群和花斑蛇鲻样本群，提取2个样本群体的总基因组DNA；
(2)以所提取的总基因组DNA为模板进行PCR扩增反应；
(3)对成功扩增的PCR产物进行纯化、测序，比对测序结果。
3.根据权利要求2所述的一种鉴别梅芳蛇鲻和花斑蛇鲻的分子标记方法，其特征在于：所述步骤(2)中的PCR扩增反应的操作方法是将17.5ul的超纯水，2.5ul的10×buffer，2ul的dNTPs，0.15ul的rTaq酶，1ul的总基因组DNA模板，1ul的Primer依次加入到0.2ml的离心管中。
4.根据权利要求2所述的一种鉴别梅芳蛇鲻和花斑蛇鲻的分子标记方法，其特征在于：所述步骤(2)中的PCR扩增程序为：94℃预变性2min，(94℃变性15sec，50℃退火15sec，72℃延伸15sec)×30个循环，72℃延伸3min，4℃保存。
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