[发明专利]一种测定肉类基质样品中环境激素的方法

说明书

本发明公开了一种测定肉类基质样品中环境激素的方法，包括以下步骤：将肉糜试样置于具塞的离心管中，加入内标物、乙腈及无机盐，超声并离心，得到乙腈提取液；取乙腈提取液至细颈萃取瓶中，加入净化填料和超纯水，无机盐和有机萃取剂；用玻璃注射器抽吸萃取瓶中的溶液，抽吸后再注入至萃取瓶中，重复抽吸和注入使其混匀，将萃取瓶用橡皮泥包裹在离心管内离心，得到三相分离的澄清溶液；用装有超纯水的长针玻璃注射器插入底部水相，注入超纯水，使上层有机相浮升至萃取瓶的细颈处；用微量注射器吸取萃取瓶细颈处的有机相层作为待测试样，待测试样经过液相色谱‑质谱联用仪测试，计算得出肉糜试样中环境激素的浓度。

技术领域

本专利涉及食品检测和环境监测技术领域，尤其涉及一种从肉类基质中萃取环境激素含量的样品前处理方法及检测方法。

背景技术

环境激素，是指能够通过对人体和动物体内激素的合成、分泌、转运、结合、代谢以及清除等活动的正常进行造成干扰，或者对内分泌系统的功能产生抑制效果，从而对机体内环境的稳定、代谢、发育、生殖等方面产生影响的外源性物质。目前常见的近20种环境激素(包括4种孕激素，6种雄激素，4种雌激素及6种烷基酚类物质)为主要研究目标物质。越来越多的环境激素通过大气沉降、地表径流、土壤淋溶和直接排放等方式进入水体，水资源和淡水养殖环境受到污染，同时鱼类通过食物链对其富集，进而影响人类的健康。近年来环境激素对水生生物的污染得到了社会的广泛关注，开发出一种更快捷、更高效、多目标分析的样品前处理方法非常需要。

肉类样品基质复杂，脂肪含量高，传统的前处理方法有固相萃取(SPE)和凝胶渗透色谱(GPC)，然而SPE成本较高，GPC需要大量的有机溶剂进行洗脱。2003年，美国农业部开发了QuEChERS样品处理方法。QuEChERS(Quick，Easy，Cheap，Effective，Rugged and Safe)是一个简称，它代表着快速、简便、价格低廉、高效、耐用和安全。此方法不仅耗时短、溶剂消耗较少且操作简便，得到了大家的认同并不断加以改进，与液液微萃取方法联合提高其富集比。空气辅助液液微萃取(Air-assisted Liquid-Liquid Microextraction)是2012年由Farajzadeh和Mogaddam开发出来的一种新型微萃取方法，该方法使用空气辅助替代分散剂，利用注射器来回抽取使萃取剂和样品充分乳化，最后再通过高速离心完成相分离。与传统液液微萃取方法相比，不需要分散剂，萃取剂用量减少，对环境更为友好。

发明内容

本发明的目的是为保障食品安全，开发出一种快速、高效、灵敏并且成本相对较低的方法用于分析肉类中环境激素的方法。将空气辅助液液微萃取技术与QuEChERS结合，不需额外增加操作环节，且可强化净化和富集，为肉类基质样品的分析提供了一种更高效的前处理方法。

本发明的技术方案是，提供一种测定肉类基质样品中环境激素的方法，包括以下步骤：

S1、将肉糜试样置于具塞的离心管中，加入内标物、乙腈及无机盐，超声并离心，得到乙腈提取液；

S2、取乙腈提取液至细颈萃取瓶中，加入净化填料和超纯水，并加入无机盐用于调节离子强度，萃取瓶中还加入有机萃取剂；

S3、用玻璃注射器抽吸萃取瓶中的溶液，抽吸后再注入至萃取瓶中，重复抽吸和注入，使萃取瓶内的溶液混匀；

S4、将萃取瓶放置在离心管内离心，得到三相分离的澄清溶液；

S5、用装有超纯水的长针玻璃注射器插入萃取瓶底部，注入超纯水，使上层有机相浮升至萃取瓶的细颈处；用微量注射器吸取萃取瓶细颈处的有机相层作为待测试样，待测试样经过液相色谱-质谱联用仪测试，计算得出肉糜试样中环境激素的浓度。微量注射器为量程1mL以下的注射器。

优选地，步骤S1中，所述无机盐为无水硫酸镁和氯化钠；在3-7g(优选如5g)肉糜试样中加入10mL乙腈、4g无水硫酸镁和1g氯化钠。