[发明专利]用于纯化重组ADAMTS13和其它蛋白质的方法以及其组合物

权利要求书

1.一种用于在治疗性蛋白质组合物的纯化中使蛋白质溶液中的脂质包衣病毒污染物灭活的体外方法，所述方法包括：

提供包含治疗性蛋白质的蛋白质溶液；

在体外将所述治疗性蛋白质固定在载体上，其中所述固定通过载体上的基团和蛋白质上的基团之间的键而发生，以及其中所述固定在不存在溶剂-清洁剂混合物的条件下进行，所述混合物包含非离子型清洁剂和有机溶剂；

随后，在所述治疗性蛋白质保持固定在所述载体上时，用包含处于适合于实现脂质包衣病毒污染物灭活的浓度下的非离子型清洁剂和有机溶剂的溶剂-清洁剂混合物将所述治疗性蛋白质处理适合于实现脂质包衣病毒污染物灭活的时间。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述治疗性蛋白质为选自ADAMTS13、因子VIII、因子VIIa、因子IX、血管性血友病因子和抗MIF抗体中的至少一种。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述载体是色谱树脂。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述溶剂-清洁剂混合物包含1％Triton X-100、0.3％磷酸三正丁酯和0.3％聚山梨醇酯80。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述溶剂-清洁剂混合物的处理持续30分钟到1小时。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述方法进一步包括使用存储缓冲液将所述治疗性蛋白质从所述载体上洗脱。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述存储缓冲液具有大于7.0的pH值并包含小于10mM的钙离子、缓冲化合物、0.05％非离子型清洁剂和盐。

8.根据权利要求6所述的方法，其中，所述载体是阳离子交换树脂；以及其中在用存储缓冲液从阳离子交换树脂上洗脱的步骤之后没有超滤、渗滤或缓冲液更换步骤。

9.根据权利要求1或2所述的方法，其中，与所述治疗性蛋白质处于溶液中时的溶剂-清洁剂混合物的处理相比，所述溶剂-清洁剂混合物的处理导致所述治疗性蛋白质聚集物的形成减少。