[发明专利]检测Vero细胞DNA片段大小分布的引物对和方法有效
申请号: | 201711192899.1 | 申请日: | 2017-11-24 |
公开(公告)号: | CN109837331B | 公开(公告)日: | 2022-11-18 |
发明(设计)人: | 吴婉欣;宗伟英;朱冰美 | 申请(专利权)人: | 湖州申科生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 崔佳佳;徐迅 |
地址: | 313000 浙江省湖州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 vero 细胞 dna 片段 大小 分布 引物 方法 | ||
1.一种检测Vero细胞基因组DNA片段大小分布的引物对的组合,其中,所述引物对的组合包括至少3组引物对,并且所述各引物对扩增获得的扩增产物的长度分别为100bp以下、100-200bp以及200bp以上;
其中,所述各引物对中的正向引物和反向引物分别特异性结合于Vero细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:6和/或SEQ ID NO:15所示区段。
2.如权利要求1所述的引物对的组合,其特征在于,所述引物对的组合中的引物对选自以下引物对:
第一引物对,其中的正向引物和反向引物特异性结合于Vero细胞基因组DNA上SEQ IDNO:1所示区段,所述正向引物结合于SEQ ID NO:1所示区段的第90-132位,优选第100-122位;所述反向引物结合于SEQ ID NO:1所示区段的第147-186位,优选第157-176位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为67-87bp,优选77bp;
第二引物对,其中的正向引物和反向引物特异性结合于Vero细胞基因组DNA上SEQ IDNO:6所示区段,所述正向引物结合于SEQ ID NO:6所示区段的第94-133位,优选第104-123位;所述反向引物结合于SEQ ID NO:6所示区段的第229-264位,优选第239-254位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为141-161bp,优选151bp;
第三引物对,其中的正向引物和反向引物特异性结合于Vero细胞基因组DNA上SEQ IDNO:6所示区段,所述正向引物结合于SEQ ID NO:6所示区段的第24-63位,优选第34-53位;所述反向引物结合于SEQ ID NO:6所示区段的第229-264位,优选第239-254位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为211-231bp,优选221bp;
第四引物对,其中的正向引物和反向引物特异性结合于Vero细胞基因组DNA上SEQ IDNO:15所示区段,所述正向引物结合于SEQ ID NO:15所示区段的第5-51位,优选第15-41位;所述反向引物结合于SEQ ID NO:15所示区段的第82-123位,优选第92-113位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为89-109bp,优选99bp;
第五引物对,其中的正向引物和反向引物特异性结合于Vero细胞基因组DNA上SEQ IDNO:15所示区段,所述正向引物结合于SEQ ID NO:15所示区段的第1-35位,优选第2-25位;所述反向引物结合于SEQ ID NO:15所示区段的第119-165位,优选第129-155位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为144-164bp,优选154bp。
3.如权利要求2所述的引物对的组合,其特征在于,
所述第一引物对中的正向引物如SEQ ID NO:2所示,反向引物如SEQ ID NO:3所示;
所述第二引物对的正向引物如SEQ ID NO:7所示,反向引物如SEQ ID NO:8所示;
所述第三引物对的正向引物如SEQ ID NO:11所示,反向引物如SEQ ID NO:12所示;
所述第四引物对的正向引物如SEQ ID NO:16所示,反向引物如SEQ ID NO:17所示;
所述第五引物对的正向引物如SEQ ID NO:20所示,所述反向引物如SEQ ID NO:21所示。
4.如权利要求3所述的引物对的组合,其特征在于,所述引物对的组合至少包括下述组合:
所述第一引物对+所述第二引物对+所述第三引物对;
所述第二引物对+所述第三引物对+所述第四引物对+所述第五引物对。
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