[发明专利]重组肌红蛋白的制备方法有效
| 申请号： | 201711214207.9 | 申请日： | 2017-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN109836492B | 公开（公告）日： | 2022-07-22 |
| 发明（设计）人： | 邓盛元;崔宏达;郑晨昱 | 申请（专利权）人： | 南京理工大学 |
| 主分类号： | C07K14/805 | 分类号： | C07K14/805;C07K1/34 |
| 代理公司： | 南京理工大学专利中心 32203 | 代理人： | 刘海霞 |
| 地址： | 210094 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 肌红蛋白 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.重组肌红蛋白的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
步骤1、制备脱辅基肌红蛋白：
4℃条件下，取肌红蛋白溶于水中，用HCl溶液调节pH至2.0，静置，然后将溶液用等量丁酮萃取，直至上层丁酮无色为止，取下层浅红色脱辅基肌红蛋白溶液进行透析，低温高速离心取上清液，得到脱辅基肌红蛋白溶液，所述的离心速度为8000 r/min，离心时间为10min，离心温度为4℃；所述的透析步骤为先用4℃的5mmol/L NaHCO3透析两次，每次透析0.5h，透析两次，再用4℃的 H2O透析两次，每次透析1h，最后用4℃ 的0.1 mol/L的pH=7.0磷酸盐缓冲溶液透析1h；
步骤2、制备重组肌红蛋白：
取锌卟啉Zn（II）溶于NaOH溶液中，缓慢搅拌下滴入脱辅基蛋白溶液中，并在冰浴中静置，然后用NaOH溶液将pH调至9.5，再用G25脱盐柱洗脱，得到重组肌红蛋白，所述的洗脱溶液为0.1 mol/L的pH=7.0磷酸盐缓冲溶液。
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