[发明专利]具有SIRT 1抑制活性的糖苷类化合物及其制备方法

权利要求书

1.一种具有SIRT 1 抑制活性的糖苷类化合物的制备方法，其特征在于具体步骤如下：

1）将花椒用70%的乙醇/ 水混合溶液在室温冷浸提取3次，每次5天，合并提取液，减压浓缩至无乙醇味，得总浸膏A；

2）将总浸膏A溶于水后，进行D101大孔吸附树脂柱层析，用乙醇/ 水混合溶液为洗脱溶剂梯度洗脱，洗脱溶剂体积比为0:100、30:70、60:40、80:20、100:0，不同体积比的洗脱溶剂洗脱体积均为3倍柱体积，分别将不同体积比的洗脱液浓缩，得到五个不同的浸膏组分，所述浸膏组分为洗脱溶剂体积比为0:100的B、洗脱溶剂体积比为30:70的C、洗脱溶剂体积比为60:40的D、洗脱溶剂体积比为80:20的E、洗脱溶剂体积比为100:0的F；

3）浸膏组分B、C、D、E、F分别进行UPLC-MS/MS分析，寻找糖苷类化合物所在部位，实验发现，浸膏组分C为糖苷类化合物部位；

4）对浸膏组分C进行硅胶柱层析，用氯仿-甲醇为洗脱剂梯度洗脱，氯仿与甲醇的体积比为20:1、10:1、5:1、2:1、1:1、0:1，等份收集洗脱液，每份洗脱液采用TLC定性检测，合并含相同成分的洗脱液，得到六个不同的浸膏组分C-1～C-6；

5）对浸膏C-2进行制备HPLC分离纯化，75 mg 的C-2经半制备HPLC分离，HPLC中的流动相为12%甲醇-水，分离所用的色谱柱为Benetnach C18柱，得到三个组份：C-2-1、C-2-2、C-2-3，C-2-1经半制备HPLC分离纯化，HPLC中的流动相为8%甲醇-水，分离所用的色谱柱为Benetnach C18柱纯化，得到化合物1；C-2-2经半制备HPLC分离纯化，所用流动相为12%甲醇-水、所用色谱柱为Benetnach C18柱，得到化合物2；C-2-3经半制备HPLC分离纯化，HPLC中的流动相为12%甲醇-水，分离所用的色谱柱为Benetnach C18柱，得到化合物3，经核磁共振波谱解析确定化合物1、2和3的结构为：、和。