[发明专利]磁微粒化学发光法测定rT3含量的试剂盒及其检测方法

说明书

本发明为磁微粒化学发光法测定rT3含量的试剂盒及其检测方法，试剂盒提供了一种rT3抗原衍生物的制备方法，通过制备rT3抗原衍生物和酶标rT3抗原衍生物，可以构建出生物素化rT3抗原衍生物+抗体酶标试剂+校准品与酶标rT3抗原衍生物+生物素化rT3兔多抗+校准品两个检测体系，由于酶促发光体系在不同情况下可能需要对rT3抗原进行生物素、酶标甚至蛋白等不同情况的偶联，只需要通过制备rT3抗原衍生物这个中间体就能实现。不同体系测值与给值相关性都在0.9以上，说明相关性良好，两种测定体系相关性为0.9540，说明两种测试方法相关性良好，测试结果一致。整个反应体系反应时间短，避免了放射性污染，延长了试剂效期，灵敏度高，测试结果准确，简化了实验操作流程。

技术领域

本发明涉及一种检测试剂盒，具体为一种磁微粒化学发光法测定rT3含量的试剂盒及其检测方法。

背景技术

T3是反映甲状腺功能的一个重要指标，是T4脱去一个碘形成，rT3与T3结构基本相同，仅是三个碘原子位置与T3不同，在3、3’、5’位，在外周组织(如肝、肾等)由T4经5－脱碘酶作用生成。rT3也是反映甲状腺功能的一个指标。血清中T4、T3和rT3维持一定比例，可以反映甲状腺激素在体内代谢情况。

rT3与T3在化学结构上属异构体，但T3是参与机体代谢的重要激素，该过程消耗氧，而rT3则几乎无生理活性。rT3增加，T3减少，可以降低机体氧和能量的消耗，是机体的一种保护性机制。

rT3临床意义如下：

(1)甲亢时血清rT3增加，与血清T4、T3的变化基本一致。而部分甲亢初期或复发早期仅有rT3的升高。

(2)甲低时血清rT3降低，变化趋势与T4一致，但下降程度不及T4明显，rT3测定对甲减诊断的符合率优于T3。rT3是鉴别甲低与非甲状腺疾病功能异常的重要指标之一。

(3)非甲状腺疾病，如心肌梗死、肝硬化、糖尿病、尿毒症、脑血管意外和一些癌症病人，血清中rT3增加，T3/rT3比值降低，这一指标对上述疾病程度的判断、疗效观察及预后估计均有重要意义。

(4)羊水中rT3浓度可作为胎儿成熟的指标。如羊水中rT3低下，有助于先天性甲低的宫内诊断。

(5)药物影响：苯妥英钠可竞争抑制rT3与TBG的结合，增加rT3的清除率，故可降低rT3水平。

通常情况下，正常人体内rT3含量在约90～350pg/mL之间

作为一种重要的反映甲状腺功能的标志物，长期以来，rT3含量的测定都是基于放射性免疫原理来完成，例如ZenTech公司的产品，放射性免疫虽然有灵敏度高等优点，但是缺点也同样明显，需要对原料进行放射性标记，有放射性污染，试剂有效期短，通常一个月左右，产品操作繁琐，整个实验过程持续时间较长。

后期出现了磁微粒化学发光法，不但有放免的优点，还有效避免了放免的缺点，例如可以通过对磁珠-抗体-抗原复合物的清洗降低样本中其他成分非特异性吸附的影响，有效提高灵敏度，其次，通过将样本的浓度信号转化为发光信号，其灵敏度能够达到或者超过放免的水平，而且试剂没有放射性污染，易于操作，反应时间短，易于实现全自动。