[发明专利]过表达CgGsh1基因提高产甘油假丝酵母2-苯乙醇耐受性及产量有效
| 申请号： | 201711220429.1 | 申请日： | 2017-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN107723300B | 公开（公告）日： | 2020-08-04 |
| 发明（设计）人： | 诸葛斌;周家豪;王玉芹;陆信曜;宗红 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/52 | 分类号： | C12N15/52;C12N15/11;C12N1/19;C12R1/72 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 表达 cggsh1 基因 提高 甘油 酵母 乙醇 耐受 产量 | ||
【权利要求书】：
1.一种来源于产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)具有提高2-苯乙醇耐受性及产量的CgGsh1基因，其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1所示。
2.克隆权利要求1所述基因的引物CgGsh1 F和CgGsh1 R，其核苷酸序列如下所示：
CgGsh1 F：5’-GAAGGCCTATGGGATTGTTGTCTTTAGGTACAC-3’；
CgGsh1 R：5’-TCCCCGCGGTTAAAATATTTCATGATATTTATTATCATTC-3’。
3.一种利用CgGsh1基因提高产甘油假丝酵母2-苯乙醇耐受性及产量的方法，其包括如下步骤：
步骤1:设计如权利要求2所述的引物，从产甘油假丝酵母基因组中克隆具有提高2-苯乙醇耐受性及产量的CgGsh1基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；
步骤2:利用限制性酶切位点将其插入到产甘油假丝酵母整合表达载体pGAPa的GAP强启动子和AOXI终止子之间，获得过表达重组载体pGAPa-CgGsh1。
步骤3:通过醋酸锂(LiAC)转化法将其导入尿嘧啶营养缺陷型产甘油假丝酵母感受态细胞中，获得过表达CgGsh1基因的产甘油假丝酵母重组菌株。
4.权利要求1所述的基因在提高2-苯乙醇耐受性及产量中的应用，所述应用为将权利要求1所述的基因在产甘油假丝酵母中表达。
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