[发明专利]一种露镜的离体快速繁殖培养方法有效
申请号: | 201711220483.6 | 申请日: | 2017-11-29 |
公开(公告)号: | CN108142285B | 公开(公告)日: | 2021-05-04 |
发明(设计)人: | 曹桦;李涵;李绅崇;陆琳;赵培飞;田敏;桂敏 | 申请(专利权)人: | 云南省农业科学院花卉研究所;玉溪澄花生物科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京隆达恒晟知识产权代理有限公司 11899 | 代理人: | 杨青 |
地址: | 650205 *** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 繁殖 培养 方法 | ||
1.一种露镜的离体快速繁殖培养方法,其特征在于:具体包括以下步骤:
(1)外植体的消毒处理:外植体为1cm带有侧芽或顶芽的露镜幼嫩茎,选取外植体用流动自来水冲洗表面,在超净工作台上用75%酒精浸泡30s,无菌水清洗3-4次,再用0.1%升汞,滴入2滴吐温消毒5-8min,期间不时振荡,无菌水冲洗4-5次,用无菌滤纸吸干水分,切去切口消毒受伤的部分;
(2)诱导培养:将通过步骤(1)得到的无菌外植体接种于诱导培养基MS+0.6-0.8mg/L6-BA+0.05-0.2mg/LNAA+20-30g/L糖+7g/L琼脂中,pH值为5.8-6.0,诱导培养14-21d 后,外植体基部长出丛生芽;
(3)增殖培养:将通过步骤(2)形成的丛生芽2-3个为一丛,接种到增殖培养基MS+0.4-0.6mg/L6-BA+0.01-0.1mg/LNAA+0.1-0.2mg/L多效唑+20-30g/L糖+7g/L琼脂中,pH值为5.8-6.0,增殖培养4-6周后,增殖3-4倍,丛生芽的株高长至1.5-2cm;
(4)生根培养:将通过步骤(3)得到的丛生苗分割成2-3株,接种到生根培养基MS+0.05-0.1mg/L6-BA+0.5-1.0mg/LNAA+0.1-0.2mg/L多效唑+20-30g/L糖+7g/L琼脂中,pH值为5.8-6.0,生根培养4-6周后可出苗;
(5)炼苗与移栽:将通过步骤(4)得到的生根苗移到温室驯化5-7d,用镊子轻轻取出组培瓶苗,用50%多菌灵可湿性粉剂800倍~1000倍的稀释液全株浸泡10min,取出晾干水分,栽植于基质中,遮光75-85%,湿度60-80%,培养10-14d后,逐渐增加光照,降低湿度,得到露镜的完整植株。
2.根据权利要求1所述的一种露镜的离体快速繁殖培养方法,其特征在于:步骤(2)-(4)中,培养条件为温度20±2℃、光照强度3000~5000lx、光照12h/d,相对湿度 50%-60%。
3.根据权利要求1所述的一种露镜的离体快速繁殖培养方法,其特征在于:步骤(5)中,用镊子轻轻取出组培瓶苗后,用消毒的剪刀剪去生根苗根部。
4.根据权利要求1所述的一种露镜的离体快速繁殖培养方法,其特征在于:步骤(5)中,基质包括蛭石、腐殖土和珍珠岩,其比例为1:1:1。
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