[发明专利]一种露镜的离体快速繁殖培养方法

说明书

本发明涉及一种露镜的离体快速繁殖培养方法，属于植物组织培养技术领域，本发明选择带有侧芽或顶芽的茎段作物外植体，将表面用酒精、升汞消毒处理得到无菌植株后，通过诱导、增殖、生根培养及炼苗移栽后，得到露镜的完整植株；本发明通过对露镜茎段进行组织培养获得了露镜幼苗，该方法材料易得，消毒方便，成活率高，生产周期短，大大提高了露镜的繁殖系数和繁殖速度；其次，本发明首次实现对荨麻科冷水花属植物露镜进行离体快速繁殖培养，为露镜植物组织培养产业化、规模化生产体系奠定基础。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体的说，涉及一种露镜的离体快速繁殖培养方法。

背景技术

露镜（Pilea serpyllacea 'Globosa'），荨麻科冷水花属，雌雄异株，雌花非常小，花冠3裂，紫红色；雄花稍大点3.5mm，花冠4裂，白色。绿色的枝干肉质而多数，细小的叶疏散排布在枝干上，一般会在枝顶会形成聚生。露镜主要的观赏点还是在它那奇特的叶子，椭球状的叶子上表皮为绿色的圆球面，下表面则是半球形的透明窗面，如同一滴滴晶莹剔透的露珠。强光照射下，茎干和叶表会变成漂亮的红紫色，有莹润的光泽。紫色的叶片上表皮和叶肉组织中的钟乳体，都能保护叶片免受强紫外线的伤害，而半透明的下表面则能帮助吸收一些地面反射的光线。原产于南美洲西部的高海拔地区（委内瑞拉，玻利维亚，哥伦比亚，厄瓜多尔，秘鲁），喜欢水分充足的腐殖质土壤，露镜养护比较困难，一方面，它喜欢湿度大的环境，甚至可以半水生；另一方面，它不耐高温湿热的天气，所以夏天要营造光照充足和通风良好的环境。

目前，露镜养护在日本较多，在国内养的人是屈指可数。露镜繁殖一般采用扦插方式，繁殖速度较慢；种子繁殖不易，雌雄异株，花非常小，授粉困难。露镜的叶片观赏性独特，小巧玲珑，深受广大爱好者喜爱，又苦于市场稀缺，因此，具有潜在的市场前景及经济价值。

发明内容

为了克服背景技术中存在的问题，本发明提供了一种露镜的离体快速繁殖培养方法，建立良好的露镜组培再生体系，与传统繁殖方式相比，不受季节、材料、环境的限制，人工控制植物所需要的环境，全年均可生产，解决了露镜繁殖方式单一、速度慢、市场稀缺等问题，为露镜种苗产业化、市场化提供技术支持。

为实现上述目的，本发明是通过如下技术方案实现的：

所述的露镜的离体快速繁殖培养方法，具体包括以下步骤：

（1）外植体的消毒处理：选取外植体用流动自来水冲洗表面，在超净工作台上用75%酒精浸 泡30s，无菌水清洗3-4次，再用0.1%升汞，滴入2滴吐温消毒5-8min，期间不时振荡，无菌水冲洗4-5次，用无菌滤纸吸干水分，切去切口消毒受伤的部分；

（2）诱导培养：将通过步骤（1）得到的无菌外植体接种于诱导培养基MS+0.6-0.8mg/L6-BA+0.05-0.2mg/LNAA+20-30g/L糖+7g/L琼脂中，pH值为5.8-6.0，诱导培养14-21d 后，外植体基部长出丛生芽；

（3）增殖培养：将通过步骤（2）形成的丛生芽2-3个为一丛，接种到增殖培养基MS+0.4-0.6mg/L6-BA+0.01-0.1mg/LNAA+0.1-0.2mg/L多效唑+20-30g/L糖+7g/L琼脂中，pH值为5.8-6.0，增殖培养4-6周后，增殖3-4倍，丛生芽的株高长至1.5-2cm；

（4）生根培养：将通过步骤（3）得到的丛生苗分割成2-3株，接种到生根培养基MS+0.05-0.1mg/L6-BA+0.5-1.0mg/LNAA+0.1-0.2mg/L多效唑+20-30g/L糖+7g/L琼脂中，pH值为5.8-6.0，生根培养4-6周后可出苗；