[发明专利]一种用于超声介导基因递送的壳聚糖衍生物载体制备方法

权利要求书

1.一种用于超声介导基因递送的壳聚糖衍生物载体制备方法，该载体由液态氟碳内核和壳聚糖衍生物外壳构成，所述壳聚糖衍生物外壳的材料为正己酰壳聚糖，其特征在于包括以下步骤：

（1）合成正己酰壳聚糖；

（2）配置正己酰壳聚糖水溶液；

（3）将液态氟碳滴加到正己酰壳聚糖水溶液中，进行超声乳化处理，使液态氟碳被包裹在正己酰壳聚糖内，即得到由液态氟碳内核和壳聚糖衍生物外壳构成的纳米级壳聚糖衍生物载体。

2.根据权利要求1所述用于超声介导基因递送的壳聚糖衍生物载体制备方法，其特征在于所述步骤（1）的具体操作方法如下：

（11）称取500mg低分子壳聚糖，将其溶解于10ml纯水后，加入10ml甲醇稀释搅拌均匀；

（12）在快速磁力搅拌下逐滴加入0.66ml的正己酸酐, 并维持转速在1000rpm的搅拌条件下反应24 h；

（13）用乙醇水溶液（25% ，v/v）透析12h，再用纯水透析36h，冷冻干燥即得到改性后的壳聚糖衍生物——正己酰壳聚糖，并通过氢核磁波谱图分析鉴定该产物。

3.根据权利要求1所述用于超声介导基因递送的壳聚糖衍生物载体制备方法，其特征在于所述步骤（2）的具体操作方法如下：

取正己酰壳聚糖20mg～50mg分散于10ml纯水中溶解。

4.根据权利要求1所述用于超声介导基因递送的壳聚糖衍生物载体制备方法，其特征在于所述步骤（3）的具体操作方法如下：

（31）取正己酰壳聚糖水溶液，冰浴处理10min后，加入100ul～300ul液态氟碳；

（32）在冰浴条件下，对加入了液态氟碳的正己酰壳聚糖水溶液进行超声乳化处理，即得到用于超声介导基因递送的壳聚糖衍生物载体，并将壳聚糖衍生物载体置于4℃冰箱中备用；所述超声满足如下条件：超声振幅为30~40%，超声总时间为2min，每次超声启动3s ，间歇时间1s。

5.根据权利要求1所述用于超声介导基因递送的壳聚糖衍生物载体制备方法，其特征在于：所述液态氟碳内核的材料为全氟戊烷。