[发明专利]一种紫心马铃薯的组织培养方法

权利要求书

1.一种紫心马铃薯的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)催芽处理：选取健康紫心马铃薯块根，埋在沙床中催芽，隔天浇水、保持沙床湿润；

(2)选取外植体并预处理：待紫心马铃薯块根的芽眼萌发嫩芽长出的苗高至10-15cm时，剪取嫩芽顶端向下5-10cm的嫩枝部分，并剪去叶片、留下0.5cm的叶柄；然后，将所述嫩枝剪成带一个腋芽、且长为1.5cm的茎段；采用质量浓度为1-5g/L的多菌灵溶液浸泡所述茎段10-15min，再用流水冲洗10-15min；

(3)灭菌：用质量浓度为0.1％且滴加有3滴吐温-80的氯化汞溶液浸泡上述经过预处理后的外植体4-7min后，无菌水冲洗5次；

(4)初代培养：将上述灭菌后的外植体接种于初代培养基上培养，得无菌芽；所述初代培养基组成为：在1/2MS培养基中添加1.8-2.3mg/L的6-BA、0.2-0.5mg/L的ZT和0.2-0.4mg/L的GA₃；

(5)继代培养：将上述无菌芽切成带一个腋芽的茎段后，接种于继代增殖培养基中培养，得无菌苗；所述继代增殖培养基组成为：在MS培养基中添加1.0-3.0mg/L的6-BA、0.1-0.6mg/L的PP₃₃₃和0.4-0.8mg/L的ZT；

(6)生根培养：将上述无菌苗按单株接种于生根培养基中进行培养，即得脱毒试管苗；所述生根培养基组成为：在1/2MS培养基中添加0.1-0.6mg/L的NAA、1-1.5mg/L的AC和0.1-0.3mg/L的IBA。

2.根据权利要求1所述一种紫心马铃薯的组织培养方法，其特征在于，步骤(4)中，所述初代培养基组成为：在1/2MS培养基中添加2.0mg/L的6-BA、0.4mg/L的ZT和0.3mg/L的GA₃。

3.根据权利要求1所述一种紫心马铃薯的组织培养方法，其特征在于，步骤(5)中，所述茎段的长度为1.2-1.5cm。

4.根据权利要求1所述一种紫心马铃薯的组织培养方法，其特征在于，步骤(5)中，所述继代增殖培养基组成为：在MS培养基中添加2.5mg/L的6-BA、0.4mg/L的PP₃₃₃和0.5mg/L的ZT。

5.根据权利要求1所述一种紫心马铃薯的组织培养方法，其特征在于，步骤(6)中，所述生根培养基组成为：在1/2MS培养基中添加0.3mg/L的NAA、1.2mg/L的AC和0.2mg/L的IBA。