[发明专利]一种火麻种子诱导愈伤组织的方法有效
申请号: | 201711224773.8 | 申请日: | 2017-11-29 |
公开(公告)号: | CN107912301B | 公开(公告)日: | 2021-04-13 |
发明(设计)人: | 农艳丰;李健;朱德生 | 申请(专利权)人: | 百色学院 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;A01C1/00 |
代理公司: | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人: | 张雪 |
地址: | 533000 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 种子 诱导 组织 方法 | ||
1.一种火麻种子诱导愈伤组织的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)预处理:挑选完整饱满、大小均一的火麻种子,用流水冲洗后,采用超声波处理20min,并将火麻种子保持浸泡在介质中30-50min,其中,处理前10min的介质为40-45℃的水,处理后10min的介质为GGR溶液;将超声波处理后的火麻种子放入铺有湿布的培养皿中,再盖上一层湿布后,于25℃下放置8-10h;
(2)消毒处理:将上述经过预处理的火麻种子剥去种皮后得火麻仁,用流水将所述火麻仁冲洗10-20min后,用体积分数为70%-75%的酒精处理15-30s,再用无菌水冲洗3次,再用质量分数为0.1%的升汞处理8-11min,最后用无菌水冲洗3次;
(3)接种培养:将上述经过消毒处理的火麻仁接种于诱导培养基中培养,即得火麻愈伤组织;所述诱导培养基的组成为:在MS培养基中添加2.0-2.3mg/L的2,4-D、0.1-0.3mg/L的6-BA、1-2mg/L的GGR和0.1-0.2mg/L的GA3;
步骤(1)中,所述超声波的功率为100-120W、频率为30KHz;
步骤(1)中,所述GGR溶液的质量浓度为25-35mg/L;
步骤(2)中,所述无菌水冲洗的时间为60-70s/次;
步骤(3)中,所述培养过程为:暗培养3-6d后转光照培养,光照时间12-14h/d,光照强度为1500-1800lx;
步骤(3)中,所述诱导培养基的组成为:在MS培养基中添加2.1mg/L的2,4-D、0.2mg/L的6-BA、1.3mg/L的GGR和0.1mg/L的GA3 。
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