[发明专利]一种尿液中筛查膀胱癌分子试剂在审
申请号: | 201711230065.5 | 申请日: | 2017-11-30 |
公开(公告)号: | CN108130371A | 公开(公告)日: | 2018-06-08 |
发明(设计)人: | 周科隆;宋军 | 申请(专利权)人: | 上海纽思格生物医学科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12N15/11;C12N15/10 |
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地址: | 201806 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 膀胱癌 尿液 启动子区域 分子诊断 多基因 实时荧光PCR检测 亚硫酸氢盐 多个基因 分子试剂 核酸提取 检测结果 结果分析 无创检测 转化反应 复发率 甲基化 可预测 基因 筛查 生物技术 诊断 合并 | ||
1.一种尿液无创检测膀胱癌的分子诊断方法与试剂,包括尿液核酸提取纯化及亚硫酸氢盐转化及后续的核酸纯化,多基因启动子甲基化特异荧光PCR检测:VIM、TMEFF2、HSPA2、GDF15、ABL1、CRH、IGF2、ANXA10、UPK1B、ACTB等。
2.所述的甲基化特异荧光PCR,特征是采用TaqMan MGB探针和甲基化特异引物,对正常人及肿瘤患者的基因组DNA无扩增检测信号,经内参标化后,对亚硫酸氢盐转化后的正常人基因组DNA也无扩增检测信号,只对亚硫酸氢盐转化后的肿瘤患者基因组DNA有反应性,检出阳性信号。
3.所述核酸提取纯化方法为自动化磁珠法,所述的试剂特征为核酸提取与亚硫酸氢盐转化既可同步也可分步完成。所述的甲基化特异荧光PCR扩增检测试剂,可以是3-5种靶基因组合,也可以是更多基因组合。组合中含有用作标化细胞浓度或甲基化水平的内控基因。
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