[发明专利]一种新型双靶向果胶‑多臂聚乙二醇联合抗癌药物的制备

权利要求书

1.一种新型双靶向果胶-多臂聚乙二醇联合抗癌药物的制备方法，其特征在于：所述的双靶向纳米药物是由氨基化的叶酸修饰果胶，与载双氢青蒿素的多臂聚乙二醇耦合形成前体药物，再与另一种疏水药物羟基喜树碱以一定比例混合，自组装得到对结肠癌具有双靶向功能的叶酸-(果胶-多臂聚乙二醇)-双氢青蒿素/羟基喜树碱纳米药物。具体步骤如下：

(1)取适量叶酸溶于二甲基亚砜中，加入激活剂1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)，反应30分钟，再加入适量乙二胺，吡啶，常温避光反应24小时得到氨基化的叶酸，转移到透析膜内，透析过夜，收集透析膜内耦合物溶液，冷冻干燥，得到黄色粉末；

(2)取适量氨基化的叶酸和果胶溶于去离子水，加入激活剂EDC反应30分钟，再加入催化剂4-二甲氨基吡啶(DMAP)反应24h，将反应后的溶液透析过夜，收集透析膜内耦合物溶液，冷冻干燥，得到叶酸-果胶黄色粉末；

(3)将多臂聚乙二醇溶于吡啶中，加入激活剂EDC反应30分钟，然后加入抗癌药物双氢青蒿素(DHA)和催化剂DMAP，通氮气，35℃下搅拌反应48小时，向反应后的药液混合物中加入三倍体积乙醚(相对于溶液体积)沉淀出多臂聚乙二醇-双氢青蒿素耦合物，4000转离心收集沉淀，并用乙醚多次洗涤离心，将最终得到的沉淀物用少量去离子水溶解，转移到透析膜内，透析过夜，收集透析膜内耦合物溶液，冷冻干燥，得到多臂聚乙二醇-双氢青蒿素耦合物白色粉末；

(4)取适量多臂聚乙二醇-双氢青蒿素耦合物，溶解在二甲基亚砜中，加入激活剂EDC反应30分钟，然后加入叶酸修饰的果胶和催化剂DMAP，通氮气，35℃避光反应48小时，向反应后的药液混合物中加入三倍体积乙醚(相对于溶液体积)沉淀出叶酸-果胶-多臂聚乙二醇-双氢青蒿素耦合物前药，4000转离心收集沉淀，并用乙醚多次洗涤离心，将最终得到的沉淀物用少量去离子水溶解，转移到透析膜内，透析过夜，收集透析膜内耦合物溶液，冷冻干燥，得到叶酸-果胶-多臂聚乙二醇-双氢青蒿素黄色粉末；

(5)取适量叶酸-果胶-多臂聚乙二醇-双氢青蒿素耦合物溶解在二甲基亚砜中，搅拌均匀，逐滴滴入磷酸缓冲溶液中(PBS，pH＝7.4)，将得到的纳米粒子溶液透析，每隔6小时更换透析外液，收集透析膜内液体，冷冻干燥，得到叶酸-果胶-多臂聚乙二醇-双氢青蒿素纳米粒子粉末；

(6)取适量叶酸-果胶-多臂聚乙二醇-双氢青蒿素耦合物和疏水药物羟基喜树碱溶于二甲基亚砜，搅拌均匀，逐滴滴入磷酸缓冲溶液中(PBS，pH＝7.4)，将得到的纳米粒子溶液透析过夜，每隔6小时更换透析外液，收集透析膜内液体，冷冻干燥，得到叶酸-果胶-多臂聚乙二醇-双氢青蒿素/羟基喜树碱纳米粒子粉末。

2.根据权利要求1所述的一种新型双靶向果胶-多臂聚乙二醇联合抗癌药物的制备方法，其特征在于：

所述多臂聚乙二醇可为单臂、二臂、四臂或八臂聚乙二醇，都能自组装形成纳米粒子。

3.根据权利要求1所述的一种新型双靶向果胶-多臂聚乙二醇联合抗癌药物的制备方法，其特征在于：

所述的多臂聚乙二醇可以选择不同的官能团末端基，与不同亲水或疏水药物发生反应，形成新的化学键，通过自组装的方式与另一种疏水药物形成纳米粒子。如阿霉素、雷公藤甲素。

4.根据权利要求1所述的一种新型双靶向果胶-多臂聚乙二醇联合抗癌药物的制备方法，其特征在于：

所述的包埋药物羟基喜树碱可以由其它疏水性强的药物替代，也可以是金属纳米粒子，实现药物更多功能化应用，且药物的包埋率可控。

5.根据权利要求1所述的一种新型双靶向果胶-多臂聚乙二醇联合抗癌药物的制备方法，其特征在于：

所述的具有靶向肿瘤功能的叶酸也可以由其他药物代替，可以针对不同的肿瘤连接不同的靶向基团。

6.根据权利要求1所述的一种新型双靶向果胶-多臂聚乙二醇联合抗癌药物的制备方法，其特征在于：

所述的双靶向纳米粒子粒径均一，载药量可控，产率高，粒径范围100纳米左右，大大延长药物保留时间、生物相容性好，双重靶向作用增强对肿瘤部位的靶向富集作用。