[发明专利]香蕉冠腐病菌LAMP检测引物及其检测方法在审
| 申请号： | 201711236402.1 | 申请日： | 2017-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN107723381A | 公开（公告）日： | 2018-02-23 |
| 发明（设计）人： | 阮宏椿;石妞妞;杜宜新;陈福如;甘林;杨秀娟;代玉立 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350013 福建省福*** | 国省代码： | 福建;35 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 香蕉 病菌 lamp 检测 引物 及其 方法 | ||
1.一种香蕉冠腐病菌的LAMP检测引物，其特征在于：所述香蕉冠腐病菌的LAMP检测引物由正向外引物F3、反向外引物B3、正向内引物FIP和反向内引物BIP组成，各引物的核苷酸序列为：
F3：5’-CAGTATTCTGGCGGGCATG-3’；
B3：5’-ACCTGATCCGAGGTCAACAT-3’；
FIP: 5’-ATTTGGGGAACGCGGGTTACCGAGCGTCATTTCAACCCTCA-3’；
BIP: 5’-TCACGTCGAGCTTCCATAGCGTAGAAGTTGGGGTTTAACGGC-3’。
2. 一种香蕉冠腐病菌LAMP检测方法，其特征在于：利用权利要求1所述的香蕉冠腐病菌LAMP引物进行LAMP反应，LAMP反应体系为25 uL，反应体系包括0.2 mmol/L的F3和B3，1.6 mmol/L的FIP和BIP，Bst DNA聚合酶为8 U，DNA模板50～100 ng，12.5 uL的LAMP反应混合液，用无菌的超纯水补足25 uL；LAMP反应条件为63-65℃温育45-60 min，85℃灭活5-10 min；LAMP反应混合液含40 mM Tris-HCl，20 mM(NH4)2SO4， 20 mM KCl，16 mM MgSO4，1.6 mol/L 甜菜碱，2.0 mM dNTPs， 0.2% Trion X-100。
3.根据权利要求2所述的一种香蕉冠腐病菌的LAMP检测方法，其特征在于：待LAMP反应结束后，在LAMP反应的扩增产物中加入显色剂SYBR green I 1.0 uL，显色结果观察到绿色荧光的判断为阳性，橙色或橘黄色判断为阴性，或采用琼脂糖凝胶电泳法判断检测结果，取2.0 uL LAMP扩增产物用2%琼脂糖凝胶电泳检测，出现梯形条带判断为阳性，没有出现梯形条带则判断为阴性。
4.如权利要求1所述的香蕉冠腐病菌的LAMP检测引物在香蕉冠腐病的早期诊断和病菌监测和鉴定中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于福建省农业科学院植物保护研究所，未经福建省农业科学院植物保护研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201711236402.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
