[发明专利]一种用于提高高容量腺病毒包装效率的辅助腺病毒有效
| 申请号： | 201711239774.X | 申请日： | 2017-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN108203706B | 公开（公告）日： | 2021-03-26 |
| 发明（设计）人： | 夏海滨;单琳琳;朱贺;张伟锋 | 申请（专利权）人： | 陕西师范大学 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/61 |
| 代理公司： | 西安恒泰知识产权代理事务所 61216 | 代理人： | 李郑建 |
| 地址： | 710062 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 提高 容量 病毒 包装 效率 辅助 | ||
1.一种用于提高高容量腺病毒包装效率的辅助腺病毒，其特征在于，以5型腺病毒基因组为基础，去除了5型腺病毒基因组距离5＇端193bp到5196bp之间的DNA序列和27893bp到30990bp之间的DNA序列；在5型腺病毒基因组距离5＇端第192个碱基和第5197个碱基之间依次插入loxp序列、腺病毒包装信号Ψ、Cre基因表达框、loxp序列，插入的两个loxp序列方向保持一致；在5型腺病毒基因组距离5＇端第27892个碱基和第30991个碱基之间插入pIX基因表达框和IVa2基因表达框；
所述的Cre基因表达框由启动子、Cre基因、终止子组成；其中，Cre基因序列包含N端序列、C端序列、内含子剪切供体序列、内含子剪切受体序列，N端序列为Cre基因编码区5＇端4个碱基到1049个碱基长的DNA片段，C端序列为Cre基因编码区3＇端4个碱基到1049个碱基长的DNA片段，在N端序列的3＇端插入一段内含子剪切供体序列，在C端序列的5＇端插入一段内含子剪切受体序列，内含子剪切供体序列和剪切受体序列总长度不超过500bp；内含子剪切供体序列、Cre基因N端序列、启动子、终止子、Cre基因C端序列、内含子剪切受体序列依次按照3＇到5＇的方向插入到腺病毒包装信号Ψ的3＇端。
2.如权利要求1所述的用于提高腺病毒包装效率的辅助腺病毒，其特征在于，所述的腺病毒包装信号Ψ是5型腺病毒的包装信号，具体为5型腺病毒基因组距离5＇端第193个碱基到第440个碱基之间的DNA序列，其方向为正向或反向。
3.如权利要求1所述的用于提高腺病毒包装效率的辅助腺病毒，其特征在于，所述的Cre基因表达框序列如下：
AAACGCAAGAGTCTTCTCTGTCTCGACAAGCCCAGTTTCTATTGGTCTCCTTAAACCTGTCTTGTAACCTTGATACTTACCTGGTCGAAATCAGTGCGTTCGAACGCTAGAGCCTGTTTTGCACGTTCACCGGCATCAACGTTTTCTTTTCGGATCCGCCGCATAACCAGTGAAACAGCATTGCTGTCACTTGGTCGTGGCAGCCCGGACCGACGATGAAGCATGTTTAGCTGGCCCAAATGTTGCTGGATAGTTTTTACTGCCAGACCGCGCGCCTGAAGATATAGAAGATAATCGCGAACATCTTCAGGTTCTGCGGGAAACCATTTCCGGTTATTCAACTTGCACCATGCCGCCCACGACCGGCAAACGGACAGAAGCATTTTCCAGGTATGCTCAGAAAACGCCTGGCGATCCCTGAACATGTCCATCAGGTTCTTGCGAACCTCATCACTCGTTGCATCGACCGGTAATGCAGGCAAATTTTGGTGTACGGTCAGTAAATTGGACACCTTCCTCTTCTTCTTGGGCATGGTGGCATCTGACGGTTCACTAAACGAGCTCTGCTTATATAGACCTCCCACCGTACACGCCTACCGCCCATTTGCGTCAATGGGGCGGAGTTGTTACGACATTTTGGAAAGTCCCGTTGATTTTGGTGCCAAAACAAACTCCCATTGACGTCAATGGGGTGGAGACTTGGAAATCCCCGTGAGTCAAACCGCTATCCACGCCCATTGATGTACTGCCAAAACCGCATCACCATGGTAATAGCGATGACTAATACGTAGATGTACTGCCAAGTAGGAAAGTCCCATAAGGTCATGTACTGGGCATAATGCCAGGCGGGCCATTTACCGTCATTGACGTCAATAGGGGGCGTACTTGGCATATGATACACTTGATGTACTGCCAAGTGGGCAGTTTACCGTAAATACTCCACCCATTGACGTCAATGGAAAGTCCCTATTGGCGTTACTATGGGAACATACGTCATTATTGACGTCAATGGGCGGGGGTCGTTGGGCGGTCAGCCAGGCGGGCCATTTACCGTAAGTTATGTAACGCCACCGCGGGGACTAGAGTCGACCTCATGGCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGAGGCAGCCGGGATCATAATCAGCCATACCACATTTGTAGAGGTTTTACTTGCTTTAAAAAACCTCCCACACCTCCCCTGAACCTGAAACATAAAATGAATGCAATTGTTGTTGTTAACTTGTTTATTGCAGCTTATAATGGTTACAAATAAAGCAATAGCATCACAAATTTCACAAATAAAGCATTTTTTTCACTGCATTCTAGTTGTGGTTTGTCCAAACTCATCAATGTATCTTATCATGTCTGGATCTCCCCGCGGTGCTAATCGCCATCTTCCAGCAGGCGCACCATTGCCCCTGTTTCACTATCCAGGTTACGGATATAGTTCATGACAATATTTACATTGGTCCAGCCACCAGCTTGCATGATCTCCGGTATTGAAACTCCAGCGCGGGCCATATCTCGCGCGGCTCCGACACGGGCACTGTGTCCAGACCAGGCCAGGTATCTCTGACCAGAGTCATCCTTAGCGCCGTAAATCAATCGATGAGTTGCTTCAAAAATCCCTTCCAGGGCGCGAGTTGATAGCTGGCTGGTGGCAGATGGCGCGGCAACACCATTTTTTCTGACCCGGCAAAACAGGTAGTTATTCGGATCATCAGCTACACCAGAGACGGAAATCCATCGCTCGACCAGTTTAGTTACCCCCAGGCTAAGTGCCTTCTCTACACCTGCGGTGCTAACCAGCGTTTTCGTTCTGCCAATATGGATTAACATTCTCCCACCGTCAGTACGTGAGATATCTTTAACCCTGATCCTGGCAATTTCGGCTATACGTAACAGGGTGTTATAAGCAATCCCCAGAAATGCCAGATTACGTATATCCTGGCAGCGATCGCTATTTTCCATGAGTGAACGAACCTGTGGAGAGAAAGGCAAAGTGGATGTCAGTAAGACCAATAGGTGCCTATCAT。
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