[发明专利]一种免疫电化学分析仪

说明书

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种免疫电化学分析仪，其制备方法及用途。所述电化学分析仪的工作电极上连接有具有抗原结合活性的酵母菌，所述电化学分析仪能够快速、准确、高效检测血液，尿液或者循环肿瘤细胞表面的HER2蛋白，该方法特异性强、准确度高，检测浓度范围可达10^‑9 mol/L。本发明还提供一种检测肿瘤标记物HER2的方法，其具有精密度高、重复性高、低成本、易操作等优点，适用于各类肿瘤相关检测。

技术领域

本发明涉及免疫检测领域，尤其是涉及一种免疫电化学分析仪及其制备方法和用途。

背景技术

人类表皮生长因子受体2 (human epidermal growth factor receptor-2，HER2，又称ErbB2) 基因，位于染色体17q12-21.32上，编码相对分子质量为185000的跨膜受体样蛋白，具有酪氨酸激酶活性，是人类表皮生长因子受体家族的成员之一。其具有重要的信号转导作用，是重要的乳腺癌预后判断因子，HER2阳性（过表达或扩增）的乳腺癌，其临床特点和生物学特性有特殊表现，治疗模式也与其他类型的乳腺癌有很大的区别，据此，HER2的有效检测对有效诊断和治疗乳腺癌具有极其重要的意义。

目前HER2的检测主要检测方法包括组织HER2检测及血清HER2检测，其中，组织HER2检测主要应用荧光原位杂交技术、显色原位杂交技术及免疫组织化学染色法，而血清HER2检测主要应用化学发光法检测蛋白胞外段。

免疫组织化学染色法（immunohistochemistry, IHC）是利用抗原抗体的特异性结合反应来检测和定位组织和细胞中的某些化学物质的一门技术，大多数病理实验室均采用此方法对HER2进行检测，IHC方法具有较快、较简便的优势，可以实现自动化操作，免疫组化切片保存较久，但其检测结果易受监步骤的影响而产生偏倚，属于半定量检测方法，检测结果的读取较为主观。

荧光原位杂交技术（Fluorescence in situ hybridization, FISH）是根据已知微生物不同分类级别上种群特异的DNA序列，以利用荧光标记的特异寡聚核苷酸片段作为探针，检测HER2基因的扩增。此方法相对于IHC法具有更高精度，可自动化操作并且稳定性较高，但其价格昂贵，并且信号强度随时间衰弱。

色素原位杂交(Chromogenicin Situ Hybridization,CISH)是指将HER2基因探针用地高辛或生物素标记，利用过氧化物酶或碱性磷酸酶的反应，在光学显微镜下检测组织mRNA的表达水平，其具有染色稳定的优点，但其属于较为新颖的技术，对实验人员操作水平要求较高，普及度较差。

HER2是重要的肿瘤生物标记物。血液中的HER2片段检测可以作为乳腺癌的检测及预后的重要指标。尿样中HER2也可以作为膀胱癌的肿瘤生物标记物。现有的检测手段一般是取肿瘤组织进行免疫染色或取血液进行ELISA检查。前一方法技术要求高，取样误诊率高，并且对病人有一定的创伤。后一方法有耗时长并且无法实时监测。针对现有技术的缺陷，本发明提供一种快速、准确检测HER2的方法，对病人无创伤、对实验操作人员要求低、准确度高、误诊率低，适用于快速检测需求。

发明内容

为了解决上述技术问题，实现HER2快速、准确检测，本发明提供一种免疫电化学分析仪，所述电化学分析仪的工作电极上连接有酵母菌。

进一步地，所述酵母菌为基因工程改造的酿酒酵母菌。

进一步地，所述酵母菌包含表面展示系统。

进一步地，所述表面展示系统包括表面多肽序列，所述表面多肽序列为具有抗原结合活性的氨基酸序列，所述表面多肽序列具有电极结合活性，优选地，所述表面多肽序列具有金属电极结合活性。