[发明专利]基于CS-Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法

权利要求书

1.基于 CS-Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一，制备anti-actin/CS-Zn/GCE电极；

步骤二，建立actin浓度的标准曲线，其中将anti-actin/CS-Zn/GCE电极为工作电极、饱和甘汞电极用作参比电极、Pt丝电极用作对电极；

步骤三，提取肉品中的actin，利用anti-actin/CS-Zn/GCE电极对其进行检测；所述anti-actin/CS-Zn/GCE电极的制备包括以下步骤：

A，制备Zn NPs：取Zn(NO₃)₂·6H₂O加入NaOH中，搅拌2 h后，加入NaBH₄在温度60℃下连续搅拌4 h，静置沉淀制得的沉淀物经清洗干燥后备用；

B，合成CS-Zn NPs：将步骤A制备的Zn NPs分散到0.1%的壳聚糖溶液中，搅拌0.5h后再加入三聚磷酸钠，搅拌5h制得混合溶液，将混合溶液透析过夜；

C，制备anti-actin/CS-Zn/GCE电极：将玻碳电极抛光至呈镜面后超声洗涤、室温干燥，后取5 µL CS-Zn NPs滴到电极表面，在空气中干燥后，再取5 µL anti-actin溶液滴在经CS-Zn NPs修饰的电极表面，晾干即可。

2.如权利要求1所述的基于 CS-Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法，其特征在于，所述步骤A中，按照体积比份数计：Zn(NO₃)₂·6H₂O为10~30份，NaOH为5~20份，NaBH₄为1~10份；Zn(NO₃)₂·6H₂O、NaOH以及NaBH₄的浓度均为0.1 mol/L。

3.如权利要求1所述的基于 CS-Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法，其特征在于，所述步骤B中，按照重量份计，所述Zn NPs为0.03份，所述壳聚糖溶液为5份，所述三聚磷酸钠为4份；其中所述壳聚糖溶液是将壳聚糖溶于1%的HAc中，所述三聚磷酸钠的浓度百分比为0.1%。

4.如权利要求1所述的基于 CS-Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法，其特征在于，所述步骤B中使用透析袋进行透析，所述透析袋截留分子量为MW=14000。

5.如权利要求1所述的基于 CS-Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法，其特征在于，所述步骤C中，所述anti-actin溶液的浓度为1 µmol/L。

6.如权利要求1所述的基于 CS-Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法，其特征在于，所述步骤二还包括配制不同浓度的actin标准溶液，之后利用anti-actin/CS-Zn/GCE电极对不同浓度actin溶液进行差示脉冲伏安（DPV）扫描，记录峰电流Ipa，将所述峰电流Ipa与actin标准溶液浓度绘制工作曲线，建立actin浓度的标准曲线。

7.如权利要求1所述的基于 CS-Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法，其特征在于，所述anti-actin/CS-Zn/GCE电极在使用前进行电化学性能测试，具体为：采用线性扫描伏安法（LSV）和电化学阻抗（EIS）对CS-Zn/GCE，anti-actin/CS-Zn/GCE和actin/anti-actin/CS-Zn/GCE进行电极性能检测，其中，电解液为0.1 mol/L PBS缓冲溶液，扫描速率为100 mV/s，扫描范围为-0.2~0.7 V。