[发明专利]基于CS-Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法有效
申请号: | 201711240609.6 | 申请日: | 2017-11-30 |
公开(公告)号: | CN107991374B | 公开(公告)日: | 2019-12-10 |
发明(设计)人: | 孙冲;王道营;张牧焓;李鹏鹏;邹烨;诸永志;徐为民 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | G01N27/48 | 分类号: | G01N27/48;G01N27/416 |
代理公司: | 11369 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 史霞 |
地址: | 210014 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 cs znnps 传感器 检测 肉品中 肌动蛋白 方法 | ||
本发明公开了一种基于CS‑Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法,其包括以下步骤:步骤一,制备anti‑actin/CS‑Zn/GCE电极;步骤二,建立actin浓度的标准曲线,其中将anti‑actin/CS‑Zn/GCE电极为工作电极、饱和甘汞电极用作参比电极、Pt电极用作对电极;步骤三,提取肉品中的actin,利用anti‑actin/CS‑Zn/GCE电极对其进行检测。本发明所述基于CS‑Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法能够选用低成本原料构建anti‑actin/CS‑Zn/GCE免疫传感器,并利用该传感器对肉品中的肌动蛋白进行定量检测,其检测成本低、操作简单且灵敏度高。
技术领域
本发明涉及一种食品检测方法。更具体地说,本发明涉及一种基于CS-Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法。
背景技术
肌动蛋白(actin)是细肌丝的主要组成成分,而肉品中肌原纤维是由可调节的粗肌丝和细肌丝组成的,肌原纤维收缩是造成嫩度下降的主要原因。随着肉品新鲜度的降低,嫩度逐渐降低,肌动蛋白的含量也不断减少。因此可以通过检测肌动蛋白的含量来评价肉品的嫩度。传统的肌动蛋白检测方法主要是荧光法,但是荧光法检测过程比较复杂,成本较大。因此,迫切需要开发一种检测成本低、操作简单、灵敏度高的肌动蛋白定量检测方法。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题,并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种基于CS-Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法,其能够选用低成本原料构建anti-actin/CS-Zn/GCE免疫传感器,并利用该传感器对肉品中的肌动蛋白进行定量检测,其检测成本低、操作简单且灵敏度高。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点,提供了一种基于CS-Zn NPs传感器检测肉品中肌动蛋白的方法,其包括以下步骤:步骤一,制备anti-actin/CS-Zn/GCE电极;
步骤二,建立actin浓度的标准曲线,其中将anti-actin/CS-Zn/GCE电极为工作电极、饱和甘汞电极用作参比电极、Pt丝电极用作对电极;
步骤三,提取肉品中的actin,利用anti-actin/CS-Zn/GCE电极对其进行检测。本发明将免疫传感器用于肉品中肌动蛋白的检测中,不仅能够加快检测速度,提高实时检测的效率,同时简化检测步骤,提高检测灵敏度和精确度。
优选的是,所述步骤一中所述anti-actin/CS-Zn/GCE电极的制备包括以下步骤:
A,制备Zn NPs:取Zn(NO3)2·6H2O加入NaOH中,搅拌2h后,加入NaBH4在温度60℃下连续搅拌4h,静置沉淀制得的沉淀物经清洗干燥后备用;
B,合成CS-Zn NPs:将步骤A制备的Zn NPs分散到0.1%的壳聚糖溶液中,搅拌0.5h后再加入三聚磷酸钠,搅拌5h制得混合溶液,将混合溶液透析过夜;
C,制备anti-actin/CS-Zn/GCE电极:将玻碳电极抛光至呈镜面后超声洗涤、室温干燥,后取5μL CS-Zn NPs滴到电极表面,在空气中干燥后,再取5μL anti-actin溶液滴在上述修饰电极表面,晾干即可。在所述玻碳电极上修饰的壳聚糖金属纳米复合材料,利用成本更低的Zn离子,降低检测成本,为肉品嫩度实时检测提供一种便捷方法。
优选的是,所述步骤A中,按照体积比份数计:Zn(NO3)2·6H2O为10-30份,NaOH为5-20份,NaBH4为1-10份;Zn(NO3)2·6H2O、NaOH以及NaBH4的浓度均为0.1mol/L。
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