[发明专利]一种特异性针对溶藻弧菌的ssDNA核酸适配体及其应用有效
申请号: | 201711246446.2 | 申请日: | 2017-12-01 |
公开(公告)号: | CN108004240B | 公开(公告)日: | 2020-12-08 |
发明(设计)人: | 李鹏飞;秦启伟;余庆;陈波 | 申请(专利权)人: | 广西科学院 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/10;C40B50/06;G01N33/569 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 肖宇扬;付静 |
地址: | 530007 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 特异性 针对 弧菌 ssdna 核酸 适配体 及其 应用 | ||
1.一种特异性针对溶藻弧菌的ssDNA核酸适配体,其特征在于,所述ssDNA核酸适配体的核苷酸序列为5’-ATTTCTTACAATCTTCTTTTCACTATGTTTCTATTTCTCCATATTCCCTT-3’。
2.一种特异性针对溶藻弧菌的ssDNA核酸适配体,其特征在于,所述ssDNA核酸适配体的核苷酸序列为5’-GACGCTTACTCAGGTGTGACTCG-ATTTCTTACAATCTTCTTTTCACTATGTTTCTATTTCTCCATATTCCCTT-CGAAGGACGCAGATGAAGTCTC-3’。
3.根据权利要求1或2所述的ssDNA核酸适配体,其特征在于,所述ssDNA核酸适配体的核苷酸序列两端结合有标记物。
4.根据权利要求3所述的ssDNA核酸适配体,其特征在于,所述标记物选自生物素、酶、发光基团中的一种或多种。
5.根据权利要求4所述的ssDNA核酸适配体,其特征在于,所述发光基团选自异硫氰酸荧光素或羧基四甲基罗丹明。
6.一种应用如权利要求1或2所述ssDNA核酸适配体的ELISA检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:对ssDNA核酸适配体进行生物素标记;
步骤2:取待测样品1-100mg与步骤1所得浓度为100-200nM的ssDNA核酸适配体混合,并在冰上孵育结合20-40min;待孵育结合后,清洗待测样品,并加入100-200μl由辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,在冰上再次进行孵育结合10-40min,孵育结合后用PBS溶液清洗待测样品,并加入辣根过氧化物酶显色试剂盒中进行TMB显色液显色,使用酶标仪读取待测样品在450nm处的吸光值并记录结果,根据吸光值的变化检测待测样品中是否含有溶藻弧菌;
所述应用不包括在疾病诊断中的应用。
7.如权利要求1或2所述ssDNA核酸适配体在检测溶藻弧菌中的用途,所述用途不包括在疾病诊断中的用途。
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