[发明专利]一种线粒体转移液及其制备方法在审
| 申请号： | 201711257531.9 | 申请日： | 2017-12-01 |
| 公开（公告）号： | CN108004200A | 公开（公告）日： | 2018-05-08 |
| 发明（设计）人： | 黄家学;杨萍 | 申请（专利权）人： | 佳学基因医学技术(北京)有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京细软智谷知识产权代理有限责任公司 11471 | 代理人： | 王金宝 |
| 地址： | 102200 北京市昌平区科技园区中关村*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 线粒体 转移 及其 制备 方法 | ||
1.一种线粒体转移液，其特征在于，所述线粒体转移液包括以下组分：缓冲剂、等渗剂、钙螯合剂、定向耦合促进剂、线粒体活性促进剂和线粒体渗透通道抑制剂。
2.根据权利要求1所述的线粒体转移液，其特征在于，所述缓冲液为HEPES缓冲液，所述HEPES缓冲液中HEPES的浓度为10-30mmol/L。
3.根据权利要求1所述的线粒体转移液，其特征在于，所述等渗液为蔗糖溶液，所述蔗糖的浓度为0.8-1.2mol/L。
4.根据权利要求1所述的线粒体转移液，其特征在于，所述定向耦合促进剂为RETWWETWWTEWSQPRRRRKV-巯基乙胺，所述RETWWETWWTEWSQPRRRRKV-巯基乙胺的浓度为40-60mmol/L。
5.根据权利要求1所述的线粒体转移液，其特征在于，所述钙螯合剂为EGTA，所述EGTA的浓度为0.3-0.7mmol/L。
6.根据权利要求1所述的线粒体转移液，其特征在于，所述线粒体活性促进剂包括谷氨酸、马来酸、琥珀酸和脱氧腺苷二磷酸；所述谷氨酸的浓度为3-7mmol/L、马来酸的浓度为3-7mmol/L，琥珀酸的浓度为3-7mmol/L和脱氧腺苷二磷酸的浓度为0.5-1.5mmol/L。
7.根据权利要求1所述的线粒体转移液，其特征在于，所述线粒体渗透通道抑制剂为Ruo360，所述Ruo360的浓度为0.05-0.15mmol/L。
8.根据权利要求1所述的线粒体转移液，其特征在于，所述缓冲液为HEPES缓冲液，所述等渗液为蔗糖溶液，所述定向耦合促进剂为RETWWETWWTEWSQPRRRRKV-巯基乙胺，所述钙螯合剂为EGTA，所述线粒体活性促进剂包括谷氨酸、马来酸、琥珀酸和脱氧腺苷二磷酸，所述线粒体渗透通道抑制剂为Ruo360；
所述HEPES缓冲液中HEPES的浓度为20mmol/L，所述蔗糖的浓度为0.8-1.2mol/L，所述RETWWETWWTEWSQPRRRRKV-巯基乙胺的浓度为50mmol/L，所述EGTA的浓度为0.5mmol/L，所述谷氨酸的浓度为5mmol/L，马来酸的浓度为5mmol/L，琥珀酸的浓度为5mmol/L和脱氧腺苷二磷酸的浓度为1mmol/L，所述Ruo360的浓度为0.1mmol/L。
9.权利要求1-8任一所述线粒体转移液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
先使用一部分水，将所有组分溶解后，调节pH值至7.0-7.4，并加入剩余部分的水，搅拌均匀即可。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，使用盐酸或氢氧化钠溶液将pH值调至7.2；搅拌均匀，然后使用0.25um的滤膜过滤灭菌后放置在4℃的环境中保存。
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