[发明专利]一种蒙古扁桃组培快繁的方法

说明书

本发明提供了一种蒙古扁桃组培快繁的方法，包括以下步骤：1)将蒙古扁桃种子依次经过流动水冲洗、酒精浸泡消毒、HgCl₂溶液浸泡消毒和无菌水冲洗后获得消毒种子；2)将所述消毒种子去皮后接种于1/2MS固体培养基培养15～20天获得无菌苗；3)从所述无菌苗上获取带叶腋的茎段接种于腋芽诱导培养基中培养15～20天获得腋芽；4)将步骤3)获得的腋芽接种于生根培养基中培养15～20天获得组培苗。本发明所述方法污染率为零，育苗效率高，用时短，繁殖系数高。

技术领域

本发明属于植物组培技术领域，具体涉及一种蒙古扁桃组培快繁的方法。

背景技术

蒙古扁桃(Amygdalusmongolica)，又名乌兰-布衣勒斯，山樱桃，蔷薇目稀有种，属于落叶灌木，高1至2米。蒙古扁桃为喜光性树种，根系发达，耐旱、耐寒、耐瘠薄；花期为4至5月，果熟为7至8月。蒙古扁桃是戈壁荒漠区特有的旱生落叶灌木，是荒漠区和荒漠草原的景观植物和水土保持植物，也是重要的木本油料树种，已被确定为国家二级保护植物。

目前蒙古扁桃的繁殖主要方法包括种子繁殖、枝条扦插、嫁接繁殖，耗时长，效率低。而蒙古扁桃的外植体组培是以蒙古扁桃实生苗的幼嫩茎段为外植体，在实际操作中对外植体消毒要求高且污染率较高(例如耿军等2007年发表在《西北农业学报》的文章《蒙古扁桃单芽茎段培养体系的建立》中外植体污染率为18.75％)，繁殖系数低，易造成人力、物力和财力的极大浪费。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种污染率低、繁殖系数高的蒙古扁桃组培快繁的方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：一种蒙古扁桃组培快繁的方法，包括以下步骤：1)将蒙古扁桃种子依次经过流动水冲洗、酒精浸泡消毒、HgCl₂浸泡消毒和无菌水冲洗后获得消毒种子；2)将所述消毒种子去皮后接种于1/2MS固体培养基培养15～20天获得无菌苗；3)从所述无菌苗上获取带叶腋的茎段接种于腋芽诱导培养基中培养15～20天获得腋芽；4)将步骤3)获得的腋芽接种于生根培养基中培养15～20天获得组培苗。

优选的，步骤1)所述酒精浸泡消毒的时间为5～15min。

优选的，步骤1)所述HgCl₂的质量分数为0.05～0.15％。

优选的，所述HgCl₂浸泡消毒的时间为8～12min。

优选的，步骤2)中所述的1/2MS固体培养基中包括蔗糖和琼脂；所述蔗糖在1/2MS固体培养基中的浓度为12～18g/L，所述琼脂在1/2MS固体培养基中的浓度为5～10g/L；所述1/2MS固体培养基的pH值为5.7～5.9。

优选的，步骤3)所述腋芽诱导培养基为包括6-BA和IBA的MS培养基。

优选的，所述6-BA在腋芽诱导培养基中的浓度为0.8～1.2mg/L；所述IBA在腋芽诱导培养基中的浓度为2.5～3.5mg/L。

优选的，所述腋芽诱导培养基中还包括蔗糖和琼脂；所述蔗糖在腋芽诱导培养基中的浓度为12～18g/L，所述琼脂在腋芽诱导培养基中的浓度为5～10g/L；所述腋芽诱导培养基的pH值为5.7～5.9。

优选的，步骤4)中所述的生根培养基为添加IBA的1/3MS培养基；所述IBA在生根培养基中的浓度为0.8～1.2mg/L。

优选的，所述步骤2)、3)和4)中的培养温度独立为24～26℃。

本发明的有益效果：本发明所述蒙古扁桃组培快繁的方法从无菌苗上采集外植体，克服了采用实生苗外植体污染率高的情况，污染率为零，从而节约了育苗成本，提高了育苗效率。根据实施例记载本发明所述的方法用时短，繁殖系数高，45～55天可繁殖一批再生组培苗，繁殖系数为3～5。