[发明专利]醋栗番茄PI128216的组织培养方法在审
申请号: | 201711261627.2 | 申请日: | 2017-12-04 |
公开(公告)号: | CN108040873A | 公开(公告)日: | 2018-05-18 |
发明(设计)人: | 李文慧;张永彬;周新刚;吴凤芝;潘凯;刘守伟 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 孙皓晨;马鑫 |
地址: | 150030 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 醋栗 番茄 pi128216 组织培养 方法 | ||
1.一种醋栗番茄PI128216的组织培养方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将颗粒饱满的醋栗番茄PI128216种子放入无菌水中浸泡4~5h后,用75v/v%酒精消毒30s,无菌水冲洗3次,然后用3w/v%NaClO溶液浸泡3-5min,之后再用无菌水将种子冲洗3次,用无菌纸将种子表面水分吸干;最后将种子接入种子萌发培养基中,放入人工气候室进行培养获得无菌苗;
(2)愈伤组织的诱导及不定芽的分化
将培养6~8d的无菌苗放入超净工作台内,取子叶和下胚轴进行诱导,将子叶用刀片切成0.4-0.6cm
(3)诱导生根
观察不定芽,当不定芽长至2~3cm时,在超净工作台内用刀片自芽基部切下,将再生苗接种于诱导生根培养基中进行诱导生根,得到醋栗番茄PI128216的组织培养幼苗。
2.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,步骤(1)中3w/v%NaClO溶液浸泡的时间为5min。
3.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,步骤(1)所述的种子萌发培养基为含有6~7g/L琼脂的1/2MS培养基。
4.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,步骤(2)中所述的愈伤组织培养基为含有0.2mg/L IAA、2.0mg/L 6-BA、20g/L蔗糖,6~7g/L琼脂,pH=6.8的MS培养基。
5.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,步骤(2)中所述的诱导不定芽分化培养基为含有0.1mg/L IAA、3.0mg/L 6-BA、20g/L蔗糖,6~7g/L琼脂,pH=6.8的MS培养基。
6.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,步骤(3)中所述的诱导生根培养基为含有0.1mg/L NAA、6~7g/L琼脂的1/2MS培养基。
7.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,人工气候培养室的培养温度为25℃±1℃,光照时间16h/天,光照强度2000lx。
8.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,用于醋栗番茄PI128216的组织培养的外植体为子叶。
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