[发明专利]一种基于溴甲酚绿显色法的γ-环糊精含量分光光度测定方法

权利要求书

1.一种基于溴甲酚绿显色法的γ-环糊精(γ-CD)的定量分析方法，其特征在于：探剂使用0.35mmol/L浓度的溴甲酚绿(BCG)作为γ-CD含量测定的指示剂；以pH＝4.4的乙酸/乙酸钠缓冲溶液作为测定γ-CD含量的缓冲剂，该缓冲剂由0.2moL/L乙酸钠与0.3moL/L乙酸溶液配置，并由酸度计校准；以1～5mmol/L的γ-CD水溶液作为待测样品溶液。

2.根据权利要求1所述的γ-CD含量测定方法，其特征在于：0.35mmol/L BCG溶液3mL；浓度为1～5mol/L的γ-CD溶液2mL；以pH＝4.4乙酸/乙酸钠缓冲溶液定容至25mL。

3.一种权利要求1所述的γ-CD含量测定方法，该测定方法采用权利要求1所述基于溴甲酚绿显色法的指示剂(探剂)、缓冲溶液和γ-CD待测溶液成分组成和以下实验步骤：

①测定溶液的准备

(1)0.35mmol/L BCG溶液。

(2)pH＝4.4乙酸-乙酸钠缓冲溶液，由0.2moL/L乙酸钠与0.3moL/L乙酸溶液配置，并由酸度计校准。

(3)5mmoL/Lγ-CD溶液，由蒸馏水配置。

②样品吸光值差测定

取0.35mmol/L BCG溶液3mL加入棕色比色管中，随后加入γ-CD溶液2mL，再以pH＝4.4乙酸-乙酸钠缓冲溶液定容至25mL，震荡摇匀后，于30℃恒温水浴中静置25min后，在625nm处以缓冲溶液为参比测定其吸光度。在空白实验中，以2mL蒸馏水替代γ-CD溶液，其余实验操作相同。

吸光度差值(ΔA)＝样品吸光度(A)-空白溶液吸光度(A′)

③标准曲线的绘制

取0.35mmol/L BCG溶液3mL加入数个棕色比色管中，随后分别在各管中加入浓度为1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L、4mmol/L、5mmol/L的γ-CD溶液各2mL，再以pH＝4.4乙酸/乙酸钠缓冲溶液将各管定容至25mL。震荡摇匀后，于30℃恒温水浴中静置25min后，在625nm处以缓冲溶液为参比测定其吸光度。在空白实验中，以2mL蒸馏水替代γ-CD溶液，其余实验操作相同。以环糊精浓度为横坐标，被测样品溶液与空白溶液吸光度差ΔA为纵坐标作图，得到一正相关曲线，作为γ-CD标准曲线。

4.根据权利3所述的γ-CD含量测定方法，其特征在于测定波长625nm，BCG浓度0.35mmol/L，乙酸/乙酸钠缓冲液pH＝4.4，显色温度30℃，显色时间25min，在棕色比色管中显色。