[发明专利]一种基于邻甲酚酞褪色法的γ-环糊精含量分光光度测定方法

权利要求书

1.一种基于邻甲酚酞褪色法的γ-环糊精(γ-CD)的定量分析方法，其特征在于：探剂使用0.21mmol/L浓度的邻甲酚酞作为γ-CD含量测定的指示剂；以pH＝9.51的碳酸钠/碳酸氢钠缓冲溶液作为测定γ-CD含量的缓冲体系，该溶液由0.1moL/L碳酸钠与0.1moL/L碳酸氢钠溶液配置，并由酸度计校准；以1.5～9mmol/L的γ-CD水溶液作为待测样品溶液。

2.根据权利要求1所述的γ-CD含量测定方法，其特征在于：0.21mmol/L邻甲酚酞溶液3mL；浓度为1.5～9mol/L的γ-CD溶液3mL；以pH＝9.51的碳酸钠/碳酸氢钠缓冲溶液将容至25mL。

3.一种权利要求1所述的γ-CD含量测定，该测定方法采用权利要求1所述基于邻甲酚酞褪色法的指示剂(探剂)、碳酸钠/碳酸氢钠缓冲溶液和γ-CD待测溶液成分组成和以下实验步骤：

①测定溶液的准备

(1)0.21mmol/L邻甲酚酞溶液。

(2)pH＝9.51的碳酸钠/碳酸氢钠缓冲溶液，由0.1moL/L碳酸钠与0.1moL/L碳酸氢钠溶液配置，并由酸度计校准。

(3)7.5mmoL/Lγ-CD溶液，由蒸馏水配置。

②样品吸光值差测定

取0.21mmol/L邻甲酚酞溶液3mL加入50mL棕色比色管中，随后加入γ-CD溶液3mL，再以pH＝9.51的碳酸钠/碳酸氢钠缓冲溶液定容至25mL，震荡摇匀后，于30℃恒温水浴中静置15min，随后在576m处以缓冲溶液为参比测定其吸光度。在空白实验中，以3mL蒸馏水替代γ-CD溶液，其余实验操作相同。

吸光度差值(ΔA)＝样品吸光度(A)-空白溶液吸光度(A′)

③标准曲线的绘制

取0.21mmol/L邻甲酚酞溶液3mL加入数个50mL棕色比色管中，随后分别在各管中加入浓度为1.5mmol/L、3mrnol/L、4.5mmol/L、6mmol/L、7.5mmol/L、9mmol/L的γ-CD溶液3mL，再以pH＝9.51的碳酸钠/碳酸氢钠缓冲溶液将各管定容至25mL。震荡摇匀后，于30℃恒温水浴中静置15min，随后在576nm处以缓冲溶液为参比测定其吸光度。在空白实验中，以3mL蒸馏水替代γ-CD溶液，其余实验操作相同。以环糊精浓度为横坐标，被测样品溶液与空白溶液吸光度差ΔA为纵坐标作图，得到一正相关曲线，作为γ-CD标准曲线。

4.根据权利3所述的γ-CD含量测定方法，其特征在于以邻甲酚酞为探剂，邻甲酚酞浓度0.21mmol/L，测定波长576nm，采用碳酸钠/碳酸氢钠缓冲体系，缓冲液pH＝9.51，显色温度30℃，显色时间15min，在50mL棕色比色管中显色。