[发明专利]一种基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针

权利要求书

1.一种基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针的制备方法，其特征在于，该方法具体包括以下步骤：

(1)制备CuNCs：配制摩尔浓度为0.1摩尔/升的氯化铜水溶液50毫升，加入0.25克牛血清白蛋白，在磁力搅拌下配制备成均质溶液，然后逐滴加入1毫升50wt％水合肼，在室温下反应6小时，然后用丙酮萃取，吸取悬浊液离心，用乙醇洗涤，真空干燥，制得CuNCs；

(2)制备CuNCs/荧光素复合物：配制质量浓度为1毫克/毫升的CuNCs水溶液50毫升，加入5毫克氮-羟基琥珀酰亚胺和10毫克1-乙基-3-(3-二甲基氨)丙基-碳二亚胺盐酸钠，在室温和磁力搅拌下，逐滴加入摩尔浓度为0.1摩尔/升的荧光素水溶液10毫升，反应1小时后产物用孔径为0.2微米的微滤膜过滤，滤液用截流分子量为1000道尔顿的透析袋透析，清除未反应的原料，袋中溶液用旋转蒸发去除90％溶剂，离心分离，乙醇洗涤，干燥得到CuNCs/荧光素复合物；

(3)配制1毫克/毫升的CuNCs/荧光素复合物水溶液10毫升，逐滴加入摩尔浓度为10毫摩尔/毫升的吗啉胍溶液，在室温和磁力搅拌下形成一系列均质混合溶液，采用荧光光谱仪测定不同吗啉胍共存浓度下均质溶液的荧光发射光谱，拟合CuNCs与荧光素荧光发射峰强度的比率I_荧光素/I_CuNCs与待测物质中吗啉胍的浓度之间的线性关系，进而构建出可定量检测吗啉胍摩尔浓度的比率荧光探针；

(4)将一系列均质溶液转入玻璃小瓶，放置于暗箱式紫外灯箱中，在365纳米紫外灯照射下，用数码相机拍摄记录小瓶中溶液的荧光颜色，依据小瓶中吗啉胍的浓度与其荧光颜色的对应关系，实现对吗啉胍摩尔浓度的比率荧光颜色可视化检测。

2.根据权利要求1所述的一种基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的CuNCs尺寸为1～5纳米。

3.根据权利要求1所述的一种基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的CuNCs/荧光素复合物尺寸为1～10纳米。

4.根据权利要求1所述的一种基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的待测物质中吗啉胍的浓度范围为0.1～10毫摩尔/升，吗啉胍的检测极限为0.01～0.1毫摩尔/升。

5.根据权利要求1所述的一种基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述的荧光颜色变化范围是红色至绿色之间。