[发明专利]一种基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针

说明书

本发明属于荧光纳米材料和可视化探针的制备技术领域，具体涉及一种基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针的制备方法，该方法主要包括以下步骤：1)采用水热法制备牛血清白蛋白稳定的红荧光发射铜纳米簇；2)通过羧胺偶联法制备铜纳米簇/荧光素纳米复合物；3)加入吗啉胍分子与牛血清白蛋白结合引起铜纳米簇红荧光淬灭，而未对荧光素绿荧光造成显著影响；4)构建铜纳米簇与荧光素的荧光发射峰强度比率与吗啉胍摩尔浓度之间的线性关系，以及吗啉胍摩尔浓度与其荧光颜色的对应关系，制备出检测吗啉胍的比率荧光可视化探针；该探针的工艺简单，制备成本低，产品灵敏度高，适用于生物样品中吗啉胍的比率荧光可视化检测。

技术领域：

本发明属于荧光纳米材料和可视化探针的制备技术领域，具体涉及一种基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针的制备方法，其制备的探针可用于吗啉胍的比率荧光可视化检测。

背景技术：

胍类化合物存在于生理体液和组织中，对生物体功能起着重要的调节作用，也可作为药物成分广泛用于制药工业中。作为重要的胍类化合物之一，吗啉胍(或病毒灵)对RNA和DNA病毒具有多种抗病毒功效。吗啉胍已被证实在丙型肝炎、流感症状、水痘带状疱疹、麻疹、腮腺炎、烟草花叶病毒等疾病的治疗中功效显著。常规用于检测吗啉胍的方法主要包括紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法，极谱法，流动注射化学发光法等。这些常规检测方法往往需要昂贵的仪器设备、复杂而耗时的操作、较高的检测成本等，削弱了在实际样品中检测吗啉胍的效率。当前，发展一种操作简单、快速和高效检测吗啉胍的方法备受关注，已成为一项亟待解决的关键技术问题。

荧光分析法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定的方法，具有灵敏度高、选择性好、操作简便等优点。由于单一荧光信号易受样品体系自体和背景荧光干扰，采用双荧光强度比值处理的比率荧光具备自校准功能，可消除了自体和背景荧光带来的干扰，提高目标物检测的准确性和可靠性。比率荧光探针方法已有文献报道，例如Y.H.Wang等基于碳点-量子点杂化物构建了铜离子比率荧光纸传感器(Y.H.Wang,C.Zhang,X.C.Chen,B.Yang,L.Yang,C.L.Jiang,Z.P.Zhang,Ratiometric fluorescentpaper sensor utilizing hybrid carbon dots-quantum dots for the visualdetermination ofcopper ions,Nanoscale,2016,8:5977-5984)；C.X.Wang等采用蓝荧光碳点与红荧光金纳米团簇发展了比率荧光温度探针(C.X.Wang，H.H.Lin，Z.Z Xu，Y.J.Huang，M.G.Humphrey,C.Zhang,Tunable carbon-dot-based dual-emissionfluorescent nanohybrids for ratiometric optical thermometry in living cells,ACS Appl.Mater.Interfaces,2016,8:6621-6628)。

贵金属纳米团簇由于其独特的光学、电学和物理学性能，受到广泛关注。铜纳米团簇(CuNCs)作为一种重要的贵金属纳米团簇，与金、银、铂、钯等纳米团簇相比，其价格更低廉，易于制备，在生物分析中获得广泛应用。CuNCs尺寸小，呈现蓝-紫至近红外光谱区较强紫外-可见吸收带、宽激发带、窄发射带、高量子产率，以及可调光致发光(即荧光)性质等。此外，CuNCs具备生物相容性好、毒性低、荧光稳定性高、发射光谱可调等诸多优点，在生物检测、光电转换、药物控释、光催化、复合/杂化材料等诸多领域具有广阔的应用前景。迄今，尚未有采用比率荧光方法检测吗啉胍，基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针的制备方法，以及对吗啉胍执行比率荧光可视化检测的国内外相关文献和专利报道。

发明内容：

本发明的目的在于克服上述现有技术存在的缺陷，设计一种方法简单、成本低廉、灵敏度高的基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针的制备方法。