[发明专利]具有双功能基团的疏水性电荷诱导层析介质的制备方法

权利要求书

1.一种具有双功能基团的疏水性电荷诱导层析介质的制备方法，其特征在于，所述层析介质包括层析基质和配基，所述的层析基质为带有羟基的亲水性多孔微球，所述的配基为3-吡咯羧酸的羧基和4-氨基-2-羰基嘧啶的氨基反应后形成的双功能配基；

所述层析基质为经粗化处理的二氧化硅微球；

所述层析基质经一缩二乙二醇双缩水甘油醚活化后依次偶联3-吡咯羧酸和4-氨基-2-羰基嘧啶形成双功能配基的疏水性电荷诱导层析介质；具体包括如下步骤：

1)将层析基质抽干后，加入0.5-1.5倍层析基质质量的20％v/v二氧六环、0.3-1.6倍层析基质质量的一缩二乙二醇双缩水甘油醚和0.3-0.7倍层析基质质量的氢氧化钠，40℃搅拌反应10-20小时，抽滤，用去离子水洗涤得到活化层析基质；

2)将活化层析基质和0.1-0.5倍层析基质质量的3-吡咯羧酸以及0.1-0.5倍层析基质质量的氢氧化钠溶液混合，在50℃下搅拌反应8-16小时，得到3-吡咯羧酸偶联的介质；

3)取3-吡咯羧酸偶联的介质，分别用体积百分比为30％、70％和100％的乙醇溶液清洗，再用二甲基甲酰胺清洗，加入0 .6-1.5倍层析基质质量的二甲基甲酰胺、2-氨基-1,3,5-三嗪和N,N-二环己基碳酰亚胺，50℃振荡10-20小时，得到2-氨基-1,3,5-三嗪活化的介质；

4)取2-氨基-1,3,5-三嗪活化的介质，依次用体积百分比为60％和40％的丁酮溶液清洗，去离子水洗涤，加入2-5倍层析基质质量的10mg/ml4-氨基-2-羰基嘧啶溶液，30℃下200rpm水浴摇床中反应12-36小时；最后将介质抽滤，去离子水洗涤，得到具有3-吡咯羧酸和4-氨基-2-羰基嘧啶双功能配基的疏水性电荷诱导层析介质。

2.如权利要求1所述的具有双功能基团的疏水性电荷诱导层析介质的制备方法，其特征在于，所述层析介质配基密度为50-150mol/ml。

3.如权利要求1所述的具有双功能基团的疏水性电荷诱导层析介质的制备方法，其特征在于，所述2-氨基-1,3,5-三嗪浓度为0.1-0.5g/ml，N,N-二环己基碳酰亚胺浓度为0.6-1g/ml。