[发明专利]具有双功能基团的疏水性电荷诱导层析介质

权利要求书

1.一种具有双功能基团的疏水性电荷诱导层析介质，其特征在于，包括层析基质和配基，所述的层析基质为带有羟基的亲水性多孔微球，所述的配基为组氨酸的羧基和2-氨基苯并噻唑的氨基反应后形成的双功能配基。

2.如权利要求1所述的具有双功能基团的疏水性电荷诱导层析介质，其特征在于，所述的层析基质为具有多孔结构和表面羟基的亲水性微球。

3.如权利要求1或2所述的具有双功能基团的疏水性电荷诱导层析介质，其特征在于层析基质为PGMA—EDMA微球。

4.一种如权利要求1所述的具有双功能基团的疏水性电荷诱导层析介质的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将层析基质抽干后，加入0.1-0.5倍层析基质质量的20％v/v二甲基亚砜、0.1-1倍层析基质质量的溴化氰和0.3-0.7倍层析基质质量的氢氧化钠，25℃下150rpm摇床中活化30-50小时，抽滤，用去离子水洗涤得到活化层析基质；

2)将活化层析基质和0.1-0.5倍层析基质质量的N-溴代丁二酰亚胺混合进行溴代醇化，25℃下150rpm摇床中反应1-5小时，抽滤，用去离子水洗涤得到溴代醇化的层析基质；

3)将溴代醇化的层析基质和0.4-0.6倍层析基质质量的组氨酸以及0.5-1M碳酸钠缓冲液混合，碳酸钠缓冲液的pH为10-12，25℃下150rpm摇床中反应4-8小时，得到组氨酸偶联的介质；

4)取组氨酸偶联的介质，分别用体积百分比为20％、50％和80％的丙酮溶液清洗，再用乙酸乙酯清洗，加入0.4-0.8倍层析基质质量的乙酸乙酯、、N-羟乙基酞酰亚胺和1,3-二环己基碳二亚胺，N-羟乙基酞酰亚胺浓度为0.1-0.5g/ml，1,3-二环己基碳二亚胺浓度为0.3-0.8g/ml，25℃振荡10-20小时，得到N-羟乙基酞酰亚胺活化的介质；

5)取N-羟乙基酞酰亚胺活化的介质，依次用体积百分比为50％和80％的丁酮溶液清洗，去离子水洗涤，加入0.2-1.5倍层析基质质量的20mg/ml 2-氨基苯并噻唑溶液，25℃下200rpm水浴摇床中反应24-36小时；最后将介质抽滤，去离子水洗涤，加入到含有2-6倍层析基质质量的乙二胺和三乙胺中，25℃下150rpm摇床中反应4-10小时，去离子水洗涤，得到具有组氨酸和2-氨基苯并噻唑双功能配基的疏水性电荷诱导层析介质，其配基密度为60-100μmol/ml。

5.如权利要求1所述的具有双功能基团的疏水性电荷诱导层析介质的制备方法，其特征在于，所述的乙二胺和三乙胺的体积比为1:1。