[发明专利]15种呼吸道感染病原体联检的引物探针组合及试剂盒

权利要求书

1.一种15种呼吸道感染病原体联检试剂盒，其特征在于，包括4个反应体系，其中：

第1个反应体系包括引物和探针组合A1-A4，其中，

组合A1用于检测肺炎克雷伯菌，包括：

P1：5’- TGCCCACTTTGTTAACGCCT-3’，

P2：5’- AGATAAAACGCCAGGCCAAGA-3’，

Probe1：5’-X₁- CGGCGTGGGATTCGCTTTCGAGCCT-Y-3’；

组合A2用于检测流感嗜血杆菌，包括：

P3：5’- CTGACCAGGTGCGTGATAGG-3’，

P4：5’-CTGACCAGGTGCGTGATAGG -3’，

Probe2：5’-X₂-TGCCCACCACGATCCGATTCCAC -Y-3’；

组合A3用于检测化脓链球菌，包括：

P5：5’- CTAGGAGCACGGATTCCAGC-3’，

P6：5’- CTAGGAGCACGGATTCCAGC-3’，

Probe3：5’-X₃- TGCCCACCACGATCCGATTCCAC-Y-3’；

组合A4用于检测金黄色葡萄球菌，包括：

P7：5’- TGTTATCCATCGCCTACGCC-3’，

P8：5’-AGTGAGAATGCCGGTGTGAG-3’，

Probe4：5’-X₄- TCGGCCTCAGCTTAGGACCCTAACCC-Y-3’；

第2个反应体系包括引物和探针组合B1-B4，其中，

组合B1用于检测大肠埃希菌，包括：

P9：5’- TATCCTTTGTTGCCAGCGGT-3’，

P10：5’- CGCTTCTCTTTGTATGCGCC-3’，

Probe5：5’-X₁-CGGCCGGGAACTCAAAGGAGACT -Y-3’；

组合B2用于检测肺炎衣原体，包括：

P11：5’-GTCCTTGCCGTAAACGATGC -3’，

P12：5’- AGGTAAGGTCCTTCGCGTTG-3’，

Probe6：5’-X₂- CCCCATCCGTGTCGGAGCTAACG-Y-3’；

组合B3用于检测化结核分枝杆菌，包括：

P13：5’-CGTAATAGGTGTCCGGCTCG -3’，

P14：5’- TAAGGGGCCTTTTGACGGTG-3’，

Probe7：5’-X₃-CGATCGGGGGCAAGTCATCGGC -Y-3’；

组合B4用于检测嗜麦芽窄食单胞菌，包括：

P15：5’- TGCGCTTTAATTGCTGCGTT-3’，

P16：5’- CAGGGCATGTTTTCTGGCAC-3’，

Probe8：5’-X₄-CGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTG -Y-3’；

第3个反应体系包括引物和探针组合C1-C4，其中，

组合C1用于检测鲍曼不动杆菌，包括：

P17：5’- AGGGCCATGATGACTTGACG-3’，

P18：5’-TCGTGTCGTGAGATGTTGGG -3’，

Probe9：5’-X₁- CGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGY-3’；

组合C2用于检测肺炎支原体，包括：

P19：5’- CAATTGTTGCTGGTGCCCTC-3’，

P20：5’- CCGGAGATCAGAGCGTTACC-3’，

Probe10：5’-X₂- CGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGG-Y-3’；

组合C3用于检测粪肠球菌，包括：

P21：5’- GTTGGTGAGGTAACGGCTCA-3’，

P22：5’- GTTGGTGAGGTAACGGCTCA-3’，

Probe11：5’-X₃-AGCACGATGCATAGCCGACCTGAGA -Y-3’；

组合C4用于检测嗜肺军团杆菌，包括：

P23：5’-CCGTCCGCTGACTGGATAAA -3’，

P24：5’- ACAGACGGCAACTGGTACTG-3’，

Probe12：5’-X₄-TGCTGCGGTACCCTGCGATTC -Y-3’；

第4个反应体系包括引物和探针组合D1-D4，其中，

组合D1用于检测肺炎链球菌，包括：

P25：5’-TGCTAAGGGCAGTACGAACC -3’，

P26：5’- GTTCGGTCAGTCGGATGTGG-3’，

Probe13：5’-X₁- TGCAGAAGAACGGTTTAAGGAGCTGAGCTGGC-Y-3’；

组合D2用于检测绿脓假单胞菌，包括：

P27：5’-AAGCCTATCGCAAGGCTGAC -3’，

P28：5’- CCTATTACTTGCGGCTGGCT-3’，

Probe14：5’-X₂- CTCTCGCTGCTCAGAAAGCTCAGCAGAC-Y-3’；

组合D3用于检测脓肿分枝杆菌，包括：

P29：5’- ACAAGCGGTGGAGTATGTGG-3’，

P30：5’-CCCAACATCTCACGACACGA -3’，

Probe15：5’-X₃-TGGTTTGATCATGGCCGGAGGCGC -Y-3’；

组合D4用于检测内参基因，包括：

P31：5’-TTTGGCTACAGCAACAGGGT -3’，

P32：5’- TTTGGCTACAGCAACAGGGT-3’，

Probe16：5’-X₄- CTCTGGGCGCTGCTCAGGCTCAGCAGAC-Y-3’ ；

其中，X₁为FAM，X₂为Cy3，X₃为Cy5，X₄为Texas red，Y为BHQ1或TAMRA。