[发明专利]一种测定生防细菌代谢产物拮抗活性的方法

权利要求书

1.一种测定生防细菌代谢产物拮抗活性的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)制备含有细菌抑制剂的植物病原真菌或生防真菌孢子悬浮液：分别取植物病原真菌或生防真菌的孢子悬浮液，添加至少一种细菌抑制剂，即获得含有细菌抑制剂的植物病原真菌或生防真菌孢子悬浮液；

2)制备含有细菌抑制剂的生防细菌发酵液：取生防细菌发酵液，添加至少一种细菌抑制剂，即获得含有细菌抑制剂的生防细菌发酵液；

3)共培养：

(1)取含有细菌抑制剂的植物病原真菌或生防真菌孢子悬浮液，加入熔化状态的培养基，混匀后倒入培养皿，培养基凝固后进行预培养，然后用打孔器在距离培养皿中心位置等距离打孔；

(2)取含有细菌抑制剂的生防细菌发酵液加入步骤(1)中打出的孔内，继续进行培养；

4)抑菌圈测定：待病原菌生长2-3d后测量培养基上孔周围的抑菌圈直径，观察抑菌圈透明程度；

细菌抑制剂的添加量不低于10μg/mL，共培养步骤中每孔加入不低于10μL的含有细菌抑制剂的生防细菌发酵液；

所述步骤1)中的植物病原真菌或生防真菌孢子悬浮液浓度不低于2.2×10⁷个/mL；

所述植物病原真菌包括胶孢炭疽菌和辣椒疫霉；所述生防真菌包括淡紫拟青霉和绿色木霉；所述生防细菌包括芽孢杆菌。

2.根据权利要求1所述的一种测定生防细菌代谢产物拮抗活性的方法,其特征在于，适合植物病原真菌或生防真菌生长的培养基包括常规的PDA或CA培养基。

3.根据权利要求1所述的一种测定生防细菌代谢产物拮抗活性的方法,其特征在于，适合生防细菌生长的培养基包括常规的NA或LB培养基。

4.根据权利要求1所述的一种测定生防细菌代谢产物拮抗活性的方法,其特征在于，所述的打孔器包括直径为6mm的打孔器。

5.根据权利要求1所述的一种测定生防细菌代谢产物拮抗活性的方法,其特征在于，步骤3)中每孔加入等体积的含有细菌抑制剂的生防细菌发酵液。