[发明专利]一种卡西酮人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种卡西酮人工半抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)Boc-L-丙氨酸与三氯甲基碳酸酯反应，得到

(b)与苯反应，得到

(c)先与NaH在溶剂的存在下反应，然后加入溴戊酸乙酯反应，得到

(d)在碱性条件下进行水解，得到所述卡西酮人工半抗原；

所述卡西酮人工半抗原的分子结构式如下所示：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(a)中，Boc-L-丙氨酸与三氯甲基碳酸酯的摩尔比为1:0.4～0.5，该反应是在溶剂中以及催化剂的条件下进行。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述溶剂为乙酸乙酯，所述催化剂为三乙胺，反应的温度为18-25℃，反应完成后，经过滤、浓缩和重结晶，得到

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，采用二氯甲烷-正己烷混合溶剂重结晶，得白色晶体

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(b)中，反应是在催化剂的条件下进行，该催化剂为无水三氯化铝，所述无水三氯化铝的摩尔添加量为的4.5～5倍。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，先用苯溶解后，再分次加入催化剂进行反应。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，反应结束后，反应混合物倒入冰水中搅拌，加入甲苯分层，水层用碱溶液中和，再用乙醚萃取，分出有机相，有机相经洗涤、干燥和过滤，干燥得到黄色固体

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(c)中，与NaH按摩尔比1:4.5～5混合，加入溶剂，反应后，按黄色固体与溴戊酸乙酯摩尔比为1:1.1～1.5加入溴戊酸乙酯，于65±2℃下搅拌反应2-5小时，经转干、萃取，得到的有机相再经干燥、过滤、转干，得棕黄色油状产物

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述溶剂为DMF。

10.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，采用乙酸乙酯和水进行萃取。

11.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(d)具体步骤为：用THF和无水甲醇溶解，加入1mol/L的NaOH水溶液进行水解；

其中，THF、无水甲醇与1mol/L的NaOH水溶液的比例为：100±5mg：2.07±0.05ml：2.65±0.05ml：9.9±0.1ml。

12.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述水解反应的温度为18-25℃，反应的时间为3-5小时。

13.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，反应结束后，调节pH＝4～5，萃取得到的有机相经干燥、过滤、转干和纯化后得到所述卡西酮人工半抗原。

14.根据权利要求13所述的制备方法，其特征在于，该步骤所用的萃取剂为二氯甲烷，萃取2-4次。

15.卡西酮人工抗原的制备方法，其特征在于，根据权利要求1-14任一项所述的方法制备卡西酮人工半抗原；

将所述卡西酮人工半抗原通过混合酸酐法或N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法与牛丙种球蛋白或牛血清白蛋白结合得到；

所述卡西酮人工抗原的分子结构式如下所示：

其中，R为牛丙种球蛋白或牛血清白蛋白。