[发明专利]一种卡西酮人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及卡西酮类人工抗原结构领域，具体而言，涉及一种卡西酮人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用。一种卡西酮人工半抗原，其特征在于，其分子结构式如下所示：本发明提供的卡西酮人工半抗原，在卡西酮的N位上引入连接臂，在该修饰位点上引入连接臂能最大程度地保留卡西酮的特征结构，且具有可以与载体蛋白发生偶联的活性基团，可作为抗原决定簇。与采用环状的连接臂相比，本发明所采用的连接臂为链状，可以尽可能的降低免疫时T细胞对连接臂识别度，这样免疫得到的抗体对卡西酮的特异性和亲合力更强。

技术领域

本发明涉及卡西酮类人工抗原结构领域，具体而言，涉及一种卡西酮 人工半抗原、人工抗原及其制备方法和应用。

背景技术

卡西酮(Cathinone)，又名benzoylethanamine(在以色列市场上又叫 hagigat)，是一种在阿拉伯茶中发现的一元胺生物碱，化学上与之相似的有： 麻黄碱，阿拉伯茶碱和其他安他非命。卡西酮能引起多巴胺释放，可能是 使阿拉伯茶产生刺激性影响的原因。

约1993年，U.S.Drug Enforcement Administration将卡西酮加入药物控 制条例的第一类药物。

目前，对卡西酮的检测主要依靠高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱 法(GC)、薄层色谱法(TLC)、质谱法(MS)等，但是存在仪器昂贵，检 测费高，并且需要专业技术人员进行操作，不能达到现代检测对快速、准 确的要求。

免疫分析法可以弥补以上所有缺点，免疫分析法是一种利用抗原抗体 特异性结合反应检测各种物质(药物、激素、蛋白质、微生物等)的分析 方法，建立小分子化合物的免疫分析方法的关键是能够制造出对小分子化 合物具有高亲和力和高特异性的抗体。但是，由于包括卡西酮在内的大多 数小分子化合物(分子量小于1000)，不具有免疫原性，即缺乏T细胞表位 而无法直接诱导动物机体产生特异性抗体，故小分子物质被称为半抗原。 通过适当的化学修饰，在半抗原分子结构的某个位置上带上端部为活性基 团的连接臂，再与大分子载体结合，生成半抗原-载体偶联物(即人工抗原)， 人工抗原可以借助T细胞表位来间接诱导B细胞的增殖和分化，继而产生 特异性抗体。

现有技术中还未有卡西酮人工半抗原、人工抗原的相关报道。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种卡西酮人工半抗原，该卡西酮人工半抗原 最大程度地保留了卡西酮的特征结构，且具有可以与载体蛋白发生偶联的 活性基团，可作为抗原决定簇；进一步制备获得的卡西酮人工抗原可免疫 获得亲和力高、灵敏度高、特异性强的抗卡西酮抗体。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种卡西酮人工半抗原，其特征在于，其分子结构式如下所示：

本发明提供的卡西酮人工半抗原，在卡西酮的N位上引入连接臂，在 该修饰位点上引入连接臂能最大程度地保留卡西酮的特征结构，且具有可 以与载体蛋白发生偶联的活性基团，可作为抗原决定簇。

与采用环状的连接臂相比，本发明所采用的连接臂为链状，可以尽可 能的降低免疫时T细胞对连接臂识别度，这样免疫得到的抗体对卡西酮的 特异性和亲合力更强。

而对于现有的4-甲基甲卡西酮类人工抗原的结构来说，其用于检测的 是4-甲基甲卡西酮类化合物。一般来讲，卡西酮类化合物包括卡西酮、甲 卡西酮和4-甲基甲卡西酮。因此，本发明提供的卡西酮人工抗原的检测 范围更广。

进一步地，本发明还提供了所述的卡西酮人工半抗原的制备方法，包 括以下步骤：

(a)Boc-L-丙氨酸与三氯甲基碳酸酯反应，得到

(b)与苯反应，得到