[发明专利]一种同时表达靶向CD19和CD20的CAR与PD1-CD28嵌合受体的慢病毒载体在审
申请号: | 201711288511.8 | 申请日: | 2017-12-07 |
公开(公告)号: | CN108085340A | 公开(公告)日: | 2018-05-29 |
发明(设计)人: | 陆哲明;张超亭 | 申请(专利权)人: | 北京市肿瘤防治研究所 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N15/66;C12N15/62;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;王璐 |
地址: | 100142 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 靶向 慢病毒载体 嵌合受体 嵌合体 分子生物学领域 杀伤肿瘤细胞 人类T细胞 靶向识别 表达效率 高效表达 关键元件 免疫抑制 肿瘤细胞 介导 感染 优化 | ||
1.一种同时表达靶向CD19和CD20的CAR与PD1-CD28嵌合受体的慢病毒载体,其特征在于,所述靶向CD19和CD20的CAR的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述PD1-CD28嵌合受体的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。
2.根据权利要求1所述的慢病毒载体,其特征在于,将表达靶向CD19和CD20的CAR与PD1-CD28嵌合受体的核苷酸序列使用Furin-linker-spacer-F2A进行连接,得到融合基因,将该融合基因构建于慢病毒载体中;
所述Furin-linker-spacer-F2A的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
3.根据权利要求2所述的慢病毒载体,其特征在于,表达靶向CD19和CD20的CAR的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;表达PD1-CD28嵌合受体的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。
4.根据权利要求2或3所述的慢病毒载体,其特征在于,在所述融合基因的上游插入启动子,所述启动子为在T细胞内高效表达的启动子。
5.根据权利要求4所述的慢病毒载体,其特征在于,所述启动子为启动子EF1α。
6.根据权利要求5所述的慢病毒载体,其特征在于,所述启动子在所述融合基因上游308~519bp处。
7.根据权利要求1~3任一项所述的慢病毒载体,其特征在于,所述慢病毒载体选自启动子为EF1α的慢病毒载体。
8.权利要求1~7任一项所述的慢病毒载体在制备抗肿瘤药物中的应用。
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