[发明专利]脑膜炎萘瑟氏菌rLP2086抗原的稳定制剂

说明书

本发明涉及脑膜炎奈瑟氏菌(Neisseria meningitidis)rLP2086的稳定制剂，所述制剂为免疫原性组合物的形式。本发明还涉及保持脑膜炎奈瑟氏菌rLP2086抗原的构象的方法，以及测定脑膜炎奈瑟氏菌rLP2086抗原的效力的方法。

本申请是2011年8月22日提交的发明名称为“脑膜炎萘瑟氏菌rLP2086抗原的稳定制剂”的中国专利申请201180050859.8的分案申请。

技术领域

本发明涉及本文所述的免疫原性组合物形式的脑膜炎萘瑟氏菌(Neisseriameningitidis)rLP2086亚族B抗原的制剂。本发明还涉及保持脑膜炎奈瑟氏菌rLP2086抗原的构象的方法，以及测定脑膜炎奈瑟氏菌rLP2086抗原的效力的方法。

发明背景

rLP2086是一种诱发针对多种脑膜炎奈瑟氏菌株的交叉反应性细菌抗体的28kDa重组脂蛋白。基于推定的氨基酸序列同源性，鉴定出了两个不同的rLP2086亚族：A和B。这两个亚族用于配制具有不同聚山梨酯80(PS-80)水平的在10mM组氨酸(pH 6.0)、150mM NaCl和0.5mg/mL铝中含有20μg/mL、60μg/mL、120μg/mL和200μg/mL各亚族的MnB-rLP2086疫苗样品。聚山梨酯80也称为TWEEN 80，是一种衍生自山梨醇的非离子型表面活性剂和乳化剂，并且作为乳化剂、增溶剂和稳定剂被频繁用于药物制剂中。聚山梨酯80在MnB rLP2086免疫原性组合物中的存在被认为会阻止在配制、加工、过滤、填充和运输过程中的聚集，减少滤膜吸收，并减少管吸收。

发明概述

在一些实施方案中，本发明提供了一种稳定的免疫原性组合物，其中LP2086亚族B多肽的效力被维持至少约1-12个月、约6-18个月、约12-24个月、约24-36个月或者约36-48个月。在一些实施方案中，所述免疫原性组合物还包含LP2086亚族A多肽。

在一些实施方案中，所述免疫原性组合物还包含洗涤剂。在一些实施方案中，洗涤剂与蛋白质的摩尔比为约0.5:1至约10:1、约1:1至约5:1或者约1.4:1至4.2:1。在一些实施方案中，洗涤剂与蛋白质的摩尔比为约2.8:1。在一些实施方案中，洗涤剂的量足以减少多肽与容器例如注射器或者小瓶中的硅的结合。在一些实施方案中,所述洗涤剂为非离子型洗涤剂例如聚山梨酯洗涤剂。在一些实施方案中，所述洗涤剂为聚山梨酯-80。

在一些实施方案中，所述免疫原性组合物还包含多价阳离子。在一些实施方案中，所述多价阳离子为钙或者铝。在一些实施方案中，所述免疫原性组合物包含磷酸钙。在一些实施方案中，所述免疫原性组合物包含磷酸铝、氢氧化铝、硫酸铝或明矾形式的铝。在一些实施方案中，铝的浓度为约0.1mg/mL至1.0mg/mL。在一些实施方案中，铝的浓度为约0.5mg/mL。

在一些实施方案中，所述免疫原性组合物还包含组氨酸。在一些实施方案中，组氨酸的浓度为约2mM至约20mM，或者约5mM至约15mM。在一些实施方案中，组氨酸的浓度为约10mM。在一些实施方案中，组氨酸的pH为约5.0至约8.0，或者约5.8至约6.0。在一些实施方案中,组氨酸的浓度为10mM，pH为6.0。

在一些实施方案中，所述免疫原性组合物还包含琥珀酸盐。在一些实施方案中，琥珀酸盐的浓度为约2mM至约10mM，或者约3mM至约7mM。在一些实施方案中,琥珀酸盐的浓度为约5mM。在一些实施方案中，琥珀酸盐的pH为约5.0至约8.0，或者约5.8至约6.0。在一些实施方案中,琥珀酸盐的浓度为5mM，pH为6.0。

在一些实施方案中，所述免疫原性组合物是冻干的。在一些实施方案中，所述冻干组合物被重悬于包含铝的缓冲液中。在一些实施方案中，铝以磷酸铝、氢氧化铝、硫酸铝或明矾的形式存在。